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放线菌能够产生大量的具有生物活性的次级代谢产物,具有重要的商业价值,现在发现的抗生素有将近将近2/3是由放线菌产生的。放线菌主要存在于土壤中,因此对土壤放线菌的研究具有重要的价值。本研究采用不同的分离方法对土壤放线菌进行筛选和鉴定,并对分离得到的菌株进行抑菌活性的测定,并进一步对发酵条件、发酵产物的稳定性进行了研究,具体实验结果如下:使用微波法、超声波湿热法和富集法对黑龙江省、广东省、山东省、浙江省、辽宁省和四川省六省市的九份土样进行自然风干和预处理后,采用选择性分离培养基淀粉-酪蛋白培养基和腐植酸培养基加50μg/mL的重铬酸钾进行放线菌的分离筛选。共分离得到89株放线菌。以常见的革兰氏阳性菌为供试菌,采用牛津杯法对分离出的89株放线菌的发酵液进行活性测定。有25株放线菌对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和藤黄微球菌(Micrococus luteus)的抑菌直径达到了15mm以上,其中菌株C1对这两种病原菌的抑菌直径都在25mm以上。采用纸片法初步检测89株放线菌发酵液对以七种常见农作物病原真菌的抑菌活性,选取活性较好的17株放线菌在离体条件下采用生长速率法进行活性复筛。结果显示,这17株放线菌对其中的至少四株病原真菌显示出了较好的抗性,其中包括14株对细菌有良好抗性的菌株,有7株放线菌对五种真菌都有抑制作用,菌株C1对七种供试病原菌都表现出了良好的抗性,对黄瓜炭疽病菌和黄瓜枯萎病菌的抑制作用分别达到了89.71%和74.63%。对菌株C1的发酵培养基和发酵条件进行优化,得到发酵培养的最佳条件为:蔗糖80g,脱脂奶粉1g,黄豆饼粉20g,K2HPO41g,FeSO4·7H2O0.1g,CaCO33g,蒸馏水1000mL,pH7.0。菌株在发酵时间为5天,发酵培养基初始PH值7.0,培养温度28℃,摇瓶转速200rpm,装液量50mL/250mL的条件下,菌体代谢更旺盛,抑菌效果最好。设置不同的梯度,对C1菌株发酵代谢产物的温度和pH稳定性进行研究。结果发现C1菌株的发酵液在30~90℃之间都有很好的稳定性,在pH4.0~10.0时,发酵液的抑菌率几乎没有改变,因此,发酵液具有较好的热稳定性和pH的稳定性。结合经典分类和分子生物学中16SrDNA分类,对菌株C1进行分类鉴定,初步认为该菌与链霉菌属类似。通过形态学特征、培养特征、生理生化特性和16SrDNA分析,初步鉴定其为链霉菌属放线菌。