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酪蛋白是乳中含量最丰富的蛋白质,含有人体生长发育所必需的氨基酸。近年来的研究结果表明,酪蛋白不但具有非常重要的生理功能,还是生物活性肽的重要来源,其中乳源降血压肽以安全性高、无副作用等优点在高血压的防治中具有十分重要的研究价值和实用价值。本课题以牛乳酪蛋白为原料,采用蛋白酶进行水解。以水解产物的ACE抑制活性为指标优化蛋白酶种类,采用超滤、凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)对得到的混合肽进行分离纯化,并最终采用质谱对分离得到的具有高活性的肽进行氨基酸序列鉴定。本实验对来源丰富的几种蛋白酶进行比较筛选,最终确定碱性蛋白酶为水解用酶,以生产牛乳酪蛋白源降血压肽。采用四因素三水平正交试验设计,以ACE抑制活性为指标,对碱性蛋白酶水解酪蛋白的酶解条件进行优化,获得水解降血压肽的最佳反应条件是：底物质量分数15%,酶用量0.15%,pH9.5,温度50℃,最适水解时间为6h。在上述实验条件下所得水解物的IC50值为0.76mg/mL。降血压肽酶解液用聚醚讽超滤膜在10℃、压力0.12MPa条件下进行分离,使用截留分子量为10kDa和3kDa的滤膜对在最佳水解条件下制备的蛋白酶水解液进行超滤。超滤得到分子量大于lOkDa、10kDa～3kDa,小于3kDa的三部分超滤液,分别测定它们的ACE抑制活性,测定结果表明分子量小于3kDa部分的ACE抑制活性最强为64.36%。经超滤后的降血压肽样品经RP-HPLC分离后主要得到7个组分峰,组分3的ACE抑制活性最高,再用一次RP-HPLC分离得到两个组分,具有最高ACE抑制活性的是组分3-2,抑制活性为93.56%。降血压肽组分3-2经过质谱分析其相对分子质量为956Da,经氨基酸序列分析其可能含一种二肽：Gly-Ala。