【摘 要】
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该研究的主要目标是构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达.该文首先构建了原核表达质粒pET3a-16L1m23和pET3a-16L2,在大肠菌中诱导融合蛋白表达
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该研究的主要目标是构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达.该文首先构建了原核表达质粒pET3a-16L1m23和pET3a-16L2<,13>,在大肠菌中诱导融合蛋白表达并对表达产物进行鉴定.然后,将线性化的杆状病毒DNA与重组杆病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组,获得两株重组杆状病毒.经鉴定该重组病毒中有晚期蛋白DNA存在;且可表达晚期蛋白;电镜观察发现重组杆状病毒感染的sf9细胞核内有类似乳头瘤病毒VLPs的形态结构.为获得稳定表达的重组病毒株及大量的VLPs,挑选了3株L1+L2共表达的重组杆状病毒单斑;并对其晚期蛋白表达条件进行了优化.
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