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隐孢子虫呈全球性分布，隐孢子虫病是一种世界性的人兽共患寄生虫病，具有重要的公共卫生意义。贝氏隐孢子虫是感染禽类的优势种，我国养鸡场常见贝氏隐孢子虫感染，但其致病剂量尚不清楚。为了探究贝氏隐孢子虫的生物学特性，本研究作了如下试验。本研究设计三个不同剂量的鸭源隐孢子虫试验感染2日龄雏鸡，通过临床症状观察、排卵囊规律和法氏囊指数及寄生器官组织扫描电镜观察，证实贝氏隐孢子虫160万个卵囊感染即可引起明显的呼吸道症状，发病鸡增重显著降低，法氏囊严重萎缩。贝氏隐孢子虫致病程度和排卵囊规律与感染剂量相关，主要病变表现呼吸道病变和法氏囊炎症。本研究将C. andersoni、C. hominis和C. baileyi卵囊经鸡胚尿囊腔接种于9日龄鸡胚，观察其在鸡胚中的发育繁殖情况。结果显示，C. andersoni和C. hominis在接种鸡胚后，尿囊膜和尿囊液中虽然可见到卵囊，但未观察到其他可运动的发育阶段虫体。C. baileyi在接种鸡胚后，尿囊膜上可见大量卵囊和带虫空泡，尿囊液中可见大量子孢子和裂殖子。说明C. andersoni和C. hominis可能不适合鸡胚培养或者其繁殖量极低，尿囊膜上卵囊可能为附着的卵囊。本试验比较C. andersoni、C. baileyi C. parvum和C. hominis4种卵囊在PBS和0.75%胆酸盐（TDC）溶液中的脱囊率，同时比较了在不同温度及脱囊液中C. baileyi卵囊的脱囊率。试验结果表明：胃腺寄生虫种对温度敏感，C. andersoni卵囊在37℃PBS中即有较高脱囊率，与在37℃0.75%TDC溶液中相比差异不显著（P＞0.05）。而肠道寄生虫种C. parvum和C. hominis在仅37℃PBS中脱囊率极低，而在37℃0.75%TDC溶液中脱囊率显著升高（P＜0.05）。C.baileyi卵囊在37℃PBS中有一定脱囊，与37℃0.75%TDC溶液中脱囊率接近（P＞0.05），提高脱囊温度至40℃卵囊脱囊率显著升高（P＜0.01），但40℃条件下在0.75%、2×0.75%或3×0.75%TDC溶液中卵囊脱囊率差异不显著（P＞0.05）。表明寄生位置不同的卵囊脱囊率在同一脱囊液或PBS中，特别是在PBS中差别明显；胃腺寄生虫种卵囊在合适温度即有较高脱囊率，而肠道寄生虫种不仅要求合适的温度，同时对脱囊液有很强依赖性。C. baileyi卵囊对脱囊条件要求更接近于胃腺寄生虫种，这对隐孢子虫基于18SrRNA等保守基因同源分析的分类结果是一个补充，对进一步了解隐孢子虫的生物学特性及体外培养研究有借鉴意义。为检测鸡胚中贝氏隐孢子虫，本研究根据GenBank公布的贝氏隐孢子虫和原鸡18S rRNA基因序列设计针对贝氏隐孢子虫的特异性引物，并以贝氏隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板，建立检测贝氏隐孢子虫SYBR Green实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）方法，同时对贝氏隐孢子虫在鸡胚中培养7d后尿囊膜和尿囊液样品中虫体DNA进行检测。结果表明，建立的SYBR GreenReal-time qPCR方法可特异性扩增出贝氏隐孢子虫，建立的标准曲线线性关系良好(R2=0.998)，卵囊基因组DNA检测阈值为10个卵囊，重复检测结果显示试验重现性较好。该方法成功检测到尿囊膜和尿囊液虫体DNA。本研究建立了快速、特异的定量检测鸡胚中贝氏隐孢子虫Real-time qPCR方法，可用于对贝氏隐孢子虫在鸡胚中繁殖规律分析和抗隐孢子虫药物筛选等研究。