瓜类蔓枯病菌的分离鉴定和西瓜抗病资源的筛选及群体结构分析

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蔓枯病(Gummy stem blight)是一种典型的真菌性土传病害,可危害西瓜(Citrullus lanatus)、甜瓜(Cucumis melon)、黄瓜(Cucumis satirus)、苦瓜(Momordica charantia)、节瓜(Benincasa hispida)、冬瓜(Benincasae hispida)等至少12个属,23 种葫芦科作物,造成瓜类的产量和品质下降,从而严重影响到我国乃至世界瓜类产业的持续发展。目前在我国江苏、浙江、江西、安徽等瓜类主要产区蔓枯病菌的种群特性和病原菌分类研究报道甚少,本文主要对该地区不同地理区域的蔓枯病菌群体进行形态观察,并利用分子生物学进行种群的分析及发育关系研究,为瓜类生产中蔓枯病害的检疫、预防及控制提供参考;目前该病害主要以化学防治、生物防治及抗性育种进行防控,其中抗性育种是该病害最经济、有效、安全的防治途径,然而具有抗病及优良农艺性状的西瓜遗传种质材料是西瓜品种改良的基础材料,明确其抗病特征和遗传基础特性,能够有效指导亲本间杂交组合的配置。1瓜类蔓枯病菌生物学鉴定和特性分析研究根据形态学特征和分子生物学进行分析及系统发育研究,首次完成鉴定影响我国江苏、安徽、浙江和江西地区瓜类蔓枯病病原类型和多样性,其中亚隔孢壳属Stagonosporopsis citrulli是引发该地区瓜类蔓枯病害的病原菌,且不同地理区域的蔓枯病菌群体在形态特征、生长属性、致病性等方面具有显著差异。对其进行rDNA-ITS序列、微管蛋白基因(BTUB)、钙调蛋白基因(CAL)序列经BLAST同源性比对显示,该地区瓜类蔓枯病分离菌株的rDNA-ITS、BTUB和CAL序列与亚隔孢壳属Stagonosporopsis相似度达到达99%以上,且BTUB和CAL序列的聚类分析与S.citrulli的同源性最高,能够有效区分引起瓜类蔓枯病害的病原菌S.cucurbitacearum、S.citrulli和S.caricae。2西瓜品种(品系)对蔓枯病抗性鉴定与筛选根据聚类分析法对不同西瓜种质资源的抗病性进行聚类分析,综合评价了供试西瓜品种资源对S.citrulli的抗病性,其中筛选出PI189225、PI482276高抗材料2份,平均受害指数分别为7.03和8.01;抗性材料19份,平均受害指数在23.04~40.10之间;中抗材料21份,平均受害指数在41.56~57.74之间;感病材料24份,平均受害指数为59.14~72.33之间;高感材料14份,平均受害指数在75.03~84.46之间,根据欧式距离进行品种材料的受害指数聚类分析,揭示了不同西瓜品种资源对蔓枯病害的抗性特征差异,将供试西瓜材料依据蔓枯病抗性分为高抗、抗、中抗、感病和高感病5个类型,其表现为高抗(HR)075。3西瓜种质资源不同蔓枯病抗性群体的结构分析采用45个多态性的SSR标记共检测到175个位点,其中具有多态性位点数为165个,多态性比率达95.41%,每对引物平均检测到等位基因位点为3.67个,PIC大小范围在0.049~0.781之间,平均值为0.415,其中有效等位基因数(Ne)、期望杂合度(He)、观测杂合度(Ho)、多样性指数(Ⅰ)及Nei’s基因的多样性指数(H)在该资源群体水平上分别为2.258、0.479、0.521、0.850和0.476。供试西瓜资源群体不同抗性材料划分为4个亚群,具有相似农艺性状及抗病性的材料其同源性存在着显著性差异,同时具有相似农艺性状且具有较高同源性的种质材料但抗病性却具有显著差异,且各亚群SM、亚群SG、亚群SW、亚群SR之间存在着明显的基因交流。
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