CpG甲基化调节神经黏附分子多聚唾液酸的合成

来源 :内蒙古医学院 内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Anody12341234
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目的探讨DNA甲基化是否能够用来作为多聚唾液酸(Polysialicacid,PSA)表达的表观遗传调控(epigeneticcontrol)。方法用甲基化特异性PCR分析成年小鼠8只和E18小鼠20只大脑四个不同区域合成多聚唾液酸的酶的基因-mST8SiaⅣ(PST)和mST8SiaⅡ(STX)启动子甲基化水平;用dot-blotting分析不同浓度的甲硫胺酸和丙戊酸对N2a细胞表面PSA表达的影响;用COBRA(Combinedbisulfiterestrictionanalysis)进一步确认基因-mST8SiaⅣ和mST8SiaⅡ启动子甲基化水平。神经细胞和神经胶质的原代培养。结果(1)胎儿鼠和成年小鼠的大脑,小脑,基底核和海马,甲基化特异性的PCR结果显示:STX基因转录起始区没有发现甲基化,在PST基因转录起始区在18天的胎儿鼠的所有四个区域和成年鼠的两个区域-大脑和小脑都发现了甲基化。(2)甲基化特异性的PCR分析原代培养的神经细胞和神经胶质细胞STX基因未发生甲基化,但是PST基因在神经胶质细胞发现的轻微的甲基化。(3)小鼠神经纤维母细胞瘤细胞株-Neuron2A细胞的PST基因启动子几乎完全被甲基化(4)不同浓度甲硫氨酸处理Neuron2A细胞,PSA表达下降;相反丙戊酸增强了PSA的表达。结论甲基化能够用来作为多聚唾液酸表达的表观遗传调控。多聚唾液酸表达的表观遗传调控可能与突触的形成和记忆的形成有关。
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