【摘 要】
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研究目的:本实验希望建立从猪脾组织中提取和纯化60kdSSA/Ro抗原的方法,为临床及研究提供廉价、高纯度的60kd SSA/Ro抗原,并将其应用于临床ELISA检测.研究方法:1.从猪脾组织
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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研究目的:本实验希望建立从猪脾组织中提取和纯化60kdSSA/Ro抗原的方法,为临床及研究提供廉价、高纯度的60kd SSA/Ro抗原,并将其应用于临床ELISA检测.研究方法:1.从猪脾组织中提取粗抗原,采用IEC、亲和层析等方法纯化60kd SSA/Ro抗原.2.运用免疫学及蛋白质组学方法验证和鉴定纯化的抗原.结果和结论:1.从猪脾中提取的60kd SSA/Ro粗抗原具有较好的抗原活性.而且猪脾价格低廉,来源丰富,是一种经济而且理想的制备SSA/Ro抗原的组织原料.2.使用离子交换(DE52)和亲和层析的方法,可将从组织中提取的60kd SSA/Ro粗抗原进行纯化,取得理想的效果.SDS-PAGE电泳后考马斯亮蓝染色只显示67-43kd之间的单一条带.该方法设备简单,操作简便,适用于60kdSSA/Ro抗原的制备.3.经免疫学方法和蛋白质组学方法鉴定,纯化得到的蛋白为60kd SSA/Ro抗原.4.纯化的60kd SSA/Ro抗原可满足临床ELISA检验方法的要求,敏感性和特异性分别达到了91.7%和83.3%.
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