脑缺血再灌注损伤后COX-2、5-LO通路的激活及棓丙酯的保护作用研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:sznzhu
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目的研究局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后花生四烯酸(AA)代谢改变及其相关因素的影响,观察环氧酶-2/5-脂氧酶(COX-2/5-LO)双向抑制剂棓丙酯(PrG)的神经保护作用,并探讨其保护机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,缺血2h,再灌注24h。动物分为假手术组、溶媒组、PrG5、7.5mg?kg-1组(PrG5、PrG7.5),于再灌注0、2h ip给药。神经功能评分法观察神经功能缺损症状;TTC染色观察脑梗死体积;HE染色观察脑组织形态学变化;AutoCAD图像分析软件计算脑水肿程度;伊文氏蓝示踪剂检测血脑屏障(BBB)通透性;免疫组化法检测脑组织COX-2、5-LO、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达;放免法检测血浆TXA2、PGI2含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白三烯B4(LTB4)浓度;生化法检测脑组织髓过氧化物酶(MPO)、还原型谷胱甘肽(GSH)及总抗氧化能力(T-AOC)。结果(1)MCAO 2h /R 24h后,脑组织缺血半暗带(IP)、海马、杏仁核区COX-2、5-LO、NF-κB蛋白表达均升高,尤以IP明显;(2)CIRI后,大鼠神经组织损伤严重,BBB破坏,脑水肿明显,神经功能缺失严重;外周血TXA2浓度上升,PGI2含量下降,TXA2/PGI2比值失调,LTB4的浓度上升;脑组织GSH和T-AOC活性下降,MPO活性升高,TNF-α与iNOS蛋白表达增加。(3)PrG5、7.5mg?kg-1均能有效缩小脑梗死灶,抑制脑水肿,改善脑组织病理改变,减轻BBB破坏,降低血浆TXA2/PGI2比值和血清LTB4浓度;下调神经细胞TNF-α、iNOS蛋白表达;增加脑组织GSH和T-AOC活性、缓解MPO升高。结论CIRI后,AA代谢途径的COX-2/5-LO通路酶激活,活性产物增加,脑组织出现严重病理改变、炎症反应、脂质过氧化等。PrG5、7.5mg?kg-1对此有明显保护作用,且大剂量效果更佳,其机制与抑制COX-2和5-LO通路活化,减轻血脑屏障破坏,抗炎,抗脂质过氧化,抑制脑组织TNF-α与iNOS表达均有关。
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