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由尖镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)侵染而引起的香蕉枯萎病是香蕉种植业中的一种毁灭性土传真菌病害,利用趋化性生防微生物防治该病害有着广阔的应用前景。本研究围绕香蕉枯萎病生防细菌资源的发掘,开展三方面的研究:(1)香蕉枯萎病拮抗菌的筛选;(2)拮抗菌的系统分类及其拮抗机理初探;(3)趋化性拮抗菌的筛选、系统发育分析及其对香蕉根系分泌物和根系分泌物化合物的趋化。获得以下主要结果:
1.从全国28个省份、121种植被的194份农业土壤样品中共分离细菌5000株,从中筛选出香蕉枯萎病菌拮抗菌420株,分离率达8.4%;其中的320株生防细菌(占总数的76.19%)对F.oxysporum f.sp.cubense菌丝生长的抑制率在30-39.99%之间,有7株细菌显示较强的拮抗活性,抑菌率大于70%。
2.基于RFLP-16S rRNA方法的系统发育分析显示,农业土壤中拮抗F.oxysporum f.sp.cubense的细菌类群主要有Bacillus属的8个种,Streptomyces属中的14个种,Pseudomonas属的2个种,Paenibacillus属的4个种,Brevibacillus属的2个种,以及Ensifer属和Providencia属的各1个种。
3.通过检测蛋白酶、纤维素酶、IAA、铁细胞、氢氰酸的产生对F.oxysporumf.sp.cubense的16种生防细菌的生防机制进行了定性分析。
4.通过CheA基因检测以及平板趋化法测定,从F.oxysporum f.sp.cubense的95株生防细菌筛选出28株趋化性生防菌;系统发育分析表明这些趋化性细菌分数6属、18个种。
5.通过GC-MS分析鉴定出香蕉根系分泌物63种,分别属于烷烃类、烯烃类、萘类、苯类、醇类、苯酚类等类型。
6.利用毛细管法定量测定了5种代表性生防细菌对香蕉根系分泌物及其7种主要化学组分的趋化性,发现供试生防菌对香蕉分析分泌物及其7个组分均有趋化性,趋化值在1.49-7之间。
7.利用毛细管法定量测定了5种代表性生防细菌对52种植物根系分泌物化学组分的趋化性,发现测试的5种生防菌对供试的52种趋化底物中的绝大多数均具有趋化性,趋化值在1.01-19.19之间,但个别种类生防菌对少数化合物无趋化性;同种生防菌对不同趋化底物的趋化能力间存在显著差异;不同种类的生防菌对同类趋化底物的趋化能力间存在显著差异。