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目的 通过建立IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠模型,观察加减黄风汤对IgAN模型大鼠蛋白尿及肾小球足细胞podocin表达的影响,讨论加减黄风汤减少IgAN蛋白尿的效果和可能产生的作用机制,为评估中医药治疗IgA肾病的疗效提供更科学、更充分的理论依据。方法 本课题采用口服牛血清白蛋白(BSA)、腹部皮下注射四氯化碳(CCL4)及尾静脉注射脂多糖(LSP)法,建立IgA肾病大鼠模型。实验随机分为正常组、模型组、雷公藤对照组、加减黄风汤低剂量治疗组、加减黄风汤高剂量治疗组。雷公藤对照组和中药治疗组在造模结束后给药,正常组与模型组造模结束后予生理盐水灌胃,各组均持续8周。第17周末各组大鼠予24小时尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮、血清白蛋白,HE和免疫荧光、电镜观察肾组织病理,各组大鼠用Western Blot检测其肾组织podocin蛋白表达情况,Real time-PCR检测其肾组织podocin mRNA表达水平。结果(1)与正常组相比,其余各组24小时尿蛋白定量均明显升高(P<0.05);与模型组相比,第17周末各给药组尿蛋白定量均明显下降(P<0.05)。(2)第17周末各组实验大鼠间血肌酐、血尿素氮及血清白蛋白均无统计学意义(P>0.05)。(3)免疫荧光显示正常组大鼠肾小球IgA荧光强度为-～±;模型组大鼠肾小球系膜区可见IgA沉积,荧光强度为++～+,其余各组肾小球系膜区IgA沉积明显较模型组减弱(P<0.05)。(4)普通光镜下(HE染色)示:模型组肾小球呈弥漫性轻中度系膜增生及系膜基质增多,间质炎性细胞浸润。雷公藤对照组、高剂量治疗组肾小球系膜基质增生不明显。低剂量治疗组可见局灶节段系膜细胞和基质增生,较模型组减轻。(5)电镜:模型组可见肾小球大部足突分融合,部分足突消失,与正常组相比有明显差异,系膜区可见电子致密物沉积。各给药组上述病变不同程度得到改善,可见足突融合减轻,部分可见正常足突结构。低剂量治疗组可见少量电子致密物沉积。(6)Podocin蛋白表达水平显示与正常组实验大鼠比较,模型组、雷公藤对照组、低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠肾组织内podocin蛋白均明显减少,差别具有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠相比,雷公藤对照组、低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠肾组织内podicn蛋白表达明显增加(P<0.05),三组之间比较差别无统计学意义(P>0.05)。(7)模型组实验大鼠肾组织podocin mRNA相对表达量较正常组明显下降(P<0.05);雷公藤对照组、低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠肾组织podocin mRNA相对表达量较模型组均增加(P<0.05);雷公藤对照组和低、高剂量组之间肾组织podocin mRNA相对表达量比较均无统计学意义(P>0.05)。结论 加减黄风汤能减少IgAN模型大鼠蛋白尿,改善肾小球系膜增生及基质增多,减少IgA沉积,减少足突融合,能明显上调肾组织podocin蛋白及mRNA的表达,提示加减黄风汤能通过调节足细胞podocin表达,增加podocin蛋白的合成,从而减少足细胞损害,修复肾小球滤过膜屏障,减少蛋白漏出并减轻肾脏损害。