劲直黄芪的化感作用及抗氧化性研究

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劲直黄芪(Astragalus strictus)是豆科黄芪属多年生草本植物,主要分布在西藏各地及青海、四川部分地区。劲直黄芪为有毒植物,主要有毒成分为苦马豆素(swainsonine),与棘豆属的一些有毒植物统称为疯草,家畜大量采食后会出现中毒性死亡,同时劲直黄芪的迅速繁殖蔓延,会使草场草群结构劣变,导致草地退化。因此对劲直黄芪有毒成分的研究、毒草的控制及防除成为减少其危害畜牧业及草地生态的最直接途径而深受关注,但其开发利用方面的研究较少,且在化感作用及多糖抗氧化方面的研究尚未见报道。本试验以分布于西藏自治区工布江达县的劲直黄芪地上部分为供体材料,以燕麦(Avena sativa)、反枝苋(Amaranthus retroflexus)、白三叶(Trifolium repens)和荠菜(Capsella bursa-pastoris)为受体植物。利用水作为提取剂对劲直黄芪进行超声提取,得到劲直黄芪水浸提液,将其浓度设为0mg/mL、12.5mg/mL、25mg/mL、50mg/mL和100mg/mL5个梯度。采用培养皿滤纸法,研究劲直黄芪地上部分水浸提液对4种受体植物种子萌发、幼苗根长、苗高和鲜重的化感效应以及对燕麦和白三叶幼苗体内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性的影响。采用L16(44×23)正交设计、超声波辅助提取法优化影响多糖提取工艺的6项因素,包括超声时间、超声温度、料夜比、超声功率、提取次数和溶剂的pH值。通过乙醇沉淀法、3因素3水平正交试验设计对劲直黄芪多糖分离工艺进行研究,3个因素分别为:乙醇浓度、沉淀时间和乙醇加入量。对提取分离出的多糖进行·OH清除能力及还原力的测定,来研究劲直黄芪多糖的抗氧化能力。主要研究结果如下:1.劲直黄芪水浸提液的化感作用劲直黄芪水浸提液对燕麦种子萌发和幼苗生长均表现为抑制作用,且随着劲直黄芪水浸提液浓度的升高其抑制程度不断增强。劲直黄芪水浸提液对反枝苋、白三叶和荠菜种子萌发均表现为抑制作用,幼苗生长呈现出“低促高抑”的化感作用,且当浓度达到100mg/mL时,反枝苋种子被完全抑制不能萌发。不同浓度的劲直黄芪水浸提液影响燕麦和白三叶幼苗体内SOD、POD活性和MDA含量,当浓度为50mg/mL时,SOD、POD活性和MDA含量显著增加(P<0.05);浓度升高到100mg/mL时,MDA含量继续增加,而SOD和POD活性呈下降趋势。2.劲直黄芪多糖的抗氧化性劲直黄芪多糖的最佳提取方法:超声时间10min、超声温度80℃、料液比1:25、超声功率350W、提取次数2次、溶液pH值为9。最佳分离方法是用5倍体积的无水乙醇沉淀3h。劲直黄芪多糖在0.2~1.0mg/mL范围内,对·OH的清除作用及还原力均与浓度呈线性关系,对·OH的IC50为2.75mg/mL,表明劲直黄芪多糖具有一定的抗氧化能力。
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