软枣猕猴桃多糖黄酮提取分离鉴定及对小鼠失眠防治作用的研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:Joexie2005
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近年来,全球慢病高发,流行病疫情加剧,越来越多的人存在失眠现象,失眠已成为当今世界的流行病,据相关数据统计,在我国有45%、欧美有10%-30%以上的人存在睡眠障碍,且失眠症在近些年呈井喷式上升,严重影响健康、工作及财产安全。软枣猕猴桃Actinidia argute Sieb.et Zucc富含多种营养物质,且维C含量丰富,其特殊的次生物质成分对人体大多数疾病(如糖尿病、高血压、高血脂等)有良好的治愈效果。本研究以10个品系的软枣猕猴桃为原材料,对多糖黄酮进行提取分离、纯化、结构解析,建立小鼠失眠模型,鉴定软枣猕猴桃中的多糖、黄酮对小鼠失眠的防治作用,结果如下:1.野生软枣猕猴桃因为产地的不同、品系的不同,其性状表现差异较大,本试验所用软枣猕猴桃果实形状主要以长圆形与扁长形为主,单果重范围在5.8213.81 g之间,可溶性固形物范围在11.70%17.30%之间,维生素C含量在352.61563.61 mg·g-1之间,可滴定酸含量范围在0.12%0.30%之间,还原糖含量范围在3.42%7.62%之间。这10个品系的软枣猕猴桃均含有萜类、酚类、鞣质、挥发油、脂类、黄酮及其苷、多糖及其苷,均不含有皂苷。2.通过红外光谱法分析结果,10中品系多糖均含有-NH2、-OH或-NH-基团。不同品系之间的差异如下:品系3、4、6、7、9以α-型糖苷键为主;品系5以β-型糖苷键为主;品系5、6、7是吡喃糖苷键类型;10品系均为酸性多糖;品系5、6、7、10多糖含量较多,品系1、4和8的多糖含量较低,其余品系多糖含量差异不显著,品系1、6、7、8和9的峰形为凸形峰,品系2、3、4、5、和10的峰形为阶梯峰。含有-NH2、-OH、-NH-的多糖官能团与凸形峰的多糖参与小鼠失眠调控。3.对软枣猕猴桃黄酮类化合物的提取分离检测,根据图谱分析,通过与标准品比较准分子离子峰,多级质谱碎片信息等,初步鉴定得出12个化合物。分别为芦丁、槲皮素、鼠李糖苷、川陈皮素、双糖苷、黄岑苷、吡喃-葡萄糖苷、山奈酚-葡萄糖苷、没食子酸酯、黄烷酮、豆薯酮、β-香树脂醇乙酸酯等物质。10品系中都含有的芦丁、豆薯酮、鼠李糖苷的黄酮类化合物参与小鼠失眠调控。4.在软枣猕猴桃多糖黄酮剂量确定实验中,确定了软枣猕猴桃多糖黄酮复合高剂量(200 mg·kg-1)治疗小鼠失眠的效果最好。即显著增加了5-HT、5-HIAA含量(P<0.01),促进睡眠效果明显,显著降低了DA、NE含量(P<0.01),抑制失眠效果明显。5-HT是一种能促进睡眠的神经递质,5-HIAA是5-HT的酸性代谢产物,5-HT和5-HIAA含量的增加间接的说明软枣猕猴桃多糖、黄酮有促进睡眠的作用;DA有维持觉醒和行为兴奋的作用,NE对维持睡眠的5-HT有拮抗效果,DA与NE含量的减少间接的说明软枣猕猴桃多糖、黄酮有抑制失眠的作用,即治疗小鼠失眠症的作用。5.在多品系软枣猕猴桃多糖、黄酮治疗失眠活性比较试验中,7号黄酮组的5-HT含量显著增加(P<0.01),1号黄酮组的5-HIAA含量显著增加(P<0.01)即促进睡眠效果明显;1号多糖组DA含量显著减少(P<0.01),1号黄酮组,7号黄酮组的NE含量显著减少(P<0.01)即抑制失眠效果明显。6.通过多糖、黄酮不同组合、不同品系之间进行分析得出:通过使5-HT、5-HIAA含量升高、DA、NE含量降低起到防治小鼠失眠作用,品系1黄酮组作用效果最显著。
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