目的 1探讨补肾调冲方对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠卵巢组织衰老基因P53、促性腺激素释放激素受体GnRHR的影响;2观察P53、GnRHR在卵巢储备功能低下大鼠卵巢中的表达情况,为中医药临床治疗卵巢储备功能低下提供理论依据和思路。方法 随机将12周龄清洁级雌性SD大鼠120只分为空白组,模型组,造模中组补肾调冲方高、中、低剂量组,造模后组补肾调冲方高、中、低剂量组,西药组,每组各10只。除空白组正常喂养外,其余各组大鼠均按75mg/kg的剂量腹腔注射环磷酰胺每日1次,共1日(14d造模结束)制备大鼠卵巢储备功能低下模型。其中造模中组即在造模的同时按照24、12、6g/kg的剂量给予补肾调冲方灌胃预防;造模后组即在造模14天结束后给予剂量24、12、6g/kg的补肾调冲方灌胃治疗,两组均连续灌药36d后观察大鼠一般情况;西药组按结合雌激素0.075mg/kg给予灌胃,方法同补肾调冲方灌胃方法。此次试验所获得的数据全都运用SPSS21.0统计工具予以分析,所获得的数据结果用均数±标准差((?)±s)代表。观察大鼠一般行为学、动情周期变化;采用酶联免疫吸附试验(Elisa)法检测大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清雌二醇(E2)及抗苗勒管激素(AMH)水平;免疫组化法及实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织衰老基因P53、促性腺激素释放激素受体GnRHR的蛋白及基因含量,分析讨论补肾调冲方对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠P53、GnRHR的影响。结果 1对大鼠一般情况的影响:空白组大鼠各方面机能良好;模型组从造模第4天开始出现脱毛、精神欠佳,小便次数增多、大便次数减少;造模中组大鼠在造模初期出现精神不振、轻微脱毛、大便偏稀等表现,逐渐给药灌胃后精神稍有好转,脱毛减少,体重先下降后增长,其中补肾调冲方高剂量组大鼠恢复最为明显;造模后组大鼠初期相应出现模型组大鼠的表现,给予药物灌胃后,体重先下降后逐渐呈稳定状态,精神活动可,少量脱毛,饮水可,大便偏软,其中补肾调冲方高剂量组大鼠恢复程度最高。2对大鼠动情周期的影响:空白组大鼠的动情周期在整个实验过程中均处于正常范围,约4~5d;模型组大鼠动情周期延长至7~10d,甚至出现紊乱,阴道涂片中上皮细胞较多,多处于动情间期;与空白组对比,各组大鼠动情周期均出现延长或紊乱,差异具有统计学意义(P<0.05);与西药组对比,造模中组补肾调冲方低剂量组动情周期差异有统计学意义(P<0.05);造模后组补肾调冲方中、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。3对大鼠血清性激素的影响:与模型组比较,各给药组大鼠血清FSH、LH、AMH、E2水平差异均具有统计学意义(P<0.01);与空白组对比,模型组血清FSH、LH水平明显升高,血清AMH、E2水平明显下降(P<0.05);造模中组补肾调冲方低剂量组血清FSH、E2、AMH水平差异有统计学意义(P<0.05);造模后组补肾调冲方中剂量组血清E2、AMH水平差异有统计学意义(P<0.05),低剂量组血清差异有统计学意义(P<0.05);与西药组对比,造模中组补肾调冲方低剂量组血清E2、AMH水平差异有统计学意义(P<0.05);造模后组补肾调冲方低剂量组血清差异具有统计学意义(P<0.05)。4对大鼠卵巢组织形态学的影响:空白组大鼠的卵巢结构清晰,可见到始基、窦前、窦状及闭锁卵泡等各级卵泡,卵泡发育良好,且体积比较大;模型组大鼠各级卵泡数目较少,卵泡发育萎缩,体积较小,卵泡内颗粒层数少;与空白组对比,各给药组卵泡发育无明显差异;与模型组对比,各给药组卵泡发育质量较好;与西药组对比,造模中组补肾调冲方低剂量组卵泡发育欠佳,体积稍萎缩;造模后组补肾调冲方中、低剂量组卵泡发育质量略差。5对大鼠卵巢中P53、GnRHR蛋白、mRNA表达的影响:与模型组比较,各组大鼠P53蛋白、mRNA表达均明显降低,GnRHR蛋白、mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组对比,模型组P53蛋白、mRNA在卵巢内的表达明显升高,GnRHR蛋白、mRNA的表达显著降低(P<0.05);造模中、后组补肾调冲方低剂量组P53、GnRHR蛋白、mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05);与西药组对比,造模中、后组补肾调冲方低剂量组卵巢内P53、GnRHR蛋白、mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05);造模后组补肾调冲方中剂量组大鼠卵巢P53蛋白、mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1环磷酰胺75mg/kg腹腔注射每日1次,共1日,能导致大鼠动情周期延长或紊乱,卵巢、子宫湿重及体质量均减轻,血清水平呈低雌高促状态,大鼠卵巢储备功能低下模型制备成功。2补肾调冲方可有效预防和治疗卵巢储备功能低下,其中补肾调冲方高剂量组的预防及治疗效果最佳,等效于结合雌激素组。3中医药可以较好地保护卵巢,明显减少抗肿瘤药物对生殖系统的损害。