海昆化瘀片调控RPE诱导的增生性玻璃体视网膜病变TGF-β表达的研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:crazyliang
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目的:转化生长因子(Transforming growth factor,TGF-β)具有调控细胞生长、分化、黏附、迁移、胞外基质产生和纤维化等系列生物作活性用,是增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)病理过程中最关键的促增生因子。本实验拟通过玻璃体腔注射视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)诱导PVR动物模型,观察海昆化瘀片对PVR动物模型玻璃体液中TGF-B浓度的影响,以探讨其对TGF-β表达的调控作用,为进一步明确海昆化瘀片的防治作用提供一定实验依据。方法:采用玻璃体腔注射0.1ml RPE细胞悬混液诱导PVR动物模型,将动物分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、海昆化瘀片高、中、低剂量治疗组,海昆化瘀片治疗组连续给予不同剂量混悬液灌胃治疗28天,阳性对照组给予道诺霉素一次性玻璃体腔注射,通过眼底观察判定眼底增生级数、常规组织病理学观察分析增生膜截面积及截面增生细胞数、免疫组化染色观察分析增殖细胞核抗原、酶联吸附法(ELISA)检测玻璃体液中TGF-B.bFGF浓度。结果:(1)PVR动物模型的判定:空白对照组与模型对照组眼底增生级数、增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性信号积分光密度(IOD)比较均有极显著差异(P<0.01)。(2)眼底增生级数:给药后第7天模型对照组阳性对照组、高剂量治疗组比较有显著差异(P<0.05),而与中、低剂量组比较无差异(P>0.05);给药后第14天模型对照组与阳性对照组、海昆化瘀片高、中剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01),与低剂量组比较有显著差异(P<0.05);给药后第21天模型对照组与阳性对照组比较有显著差异(P<0.05),与海昆化瘀片高剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01),与中、低剂量治疗组比较无差异(P>0.05);给药后第28天模型对照组与阳性对照组、海昆化瘀片高剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01),与中剂量治疗组比较有显著差异(P<0.05),与低剂量治疗组比较无差异(P>0.05)。(3)增生膜截面积与截面增生细胞数:模型对照组与各用药组比较有极显著差异(P<0.01)。(4)增殖细胞核抗原:模型对照组PCNA的IOD值与阳性对照组、海昆化瘀片高、中剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01)与低剂量治疗组比较无差异(P>0.05)。(5)TGF-B:模型对照组与阳性对照组、海昆化瘀片高、中剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01),与低剂量治疗组比较有显著差异(P<0.05)。(6)bFGF:模型对照组与阳性对照组、海昆化瘀片高、中剂量治疗组比较有极显著差异(P<0.01),与低剂量治疗组比较有显著差异(P<0.05)。结论:本实验通过玻璃体腔注射RPE细胞悬混液成功诱导PVR动物模型,研究发现海昆化瘀片能减轻PVR动物模型眼底增生程度、抑制增生膜的形成及膜内细胞增生,并通过抑制模型动物视网膜组织中PCNA的表达、降低玻璃体液中TGF-B、bFGF浓度阻止视网膜、玻璃体增生,从而发挥其防治PVR的作用。
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