湖北省烟草蚀纹病毒病调查及毒源检测

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烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus,简称TEV)属马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus),病毒粒体呈弯曲线状,是世界性分布的病毒,其寄主范围较为广泛,可侵染19个科120余种双子叶植物,其中对重要经济作物烟草带来巨大经济损失。目前,我国陕西、河南、山东等地均有TEV发生的报道。近年来,湖北烟草产区某些烟草品种疑似蚀纹病发生较为普遍,由于本病在我省尚无报道,为进一步确证引起该病的毒源,本文在对病害发生危害进行调查的基础上,从不同地区采集标样,在室内通过血清学、电镜技术、分子生物学等方法进行了毒源鉴定。主要结果如下:1、烟草蚀纹病的发生危害:2011~2012年分别对我省十堰、襄阳、宜昌和恩施主要烟草产区蚀纹病发生危害进行了实地调查。结果显示,本病在不同烟草品种上均有不同程度发生。一般发病率为12.7%~17.3%,高的为22.9%~27.2%,最低为3.6%~4.3%。发病叶片发现密布的褪绿斑点和蚀刻症状,严重时出现穿孔或叶枯死。2、病组织超薄切片:对采集的典型发病标样,按超薄程序进行病组织切片,经透射电镜观察,感病组织细胞中可见“风轮状”内含体和线状病毒粒体存在。3、血清学检测:从我省不同烟草产区,采集的383份标样,通过双抗体夹心酶联免疫法(DAS-ELISA)检测结果显示,不同产区的样本受侵染情况存在差异,其中十堰和襄阳TEV检出率分别为51.1%和51.4%,宜昌和恩施标样TEV检出率分别为29.4%和5.0%。另外,不同类型的烟草受侵染情况也不相同,烤烟TEV检出率为39.2%,白肋烟TEV检出率为21.6%,马里兰烟TEV检出率为21.1%。4:分子生物学检测:采用特异性引物进行RT-PCR反应,获得了TEV大小为789bp的特异性目标条带,与相关报道的目标条带大小一致。根据本病田间症状表现和室内鉴定结果,初步证明烟草蚀纹病在我省的发生危害。本文仅是对烟草蚀纹病的毒源进行了一般鉴定,有关该病的发生规律及防治等方面的工作尚待进一步研究。
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