本文以北京顺义地区金世纪有机化梨园施肥土壤为试材,采用传统培养法和变性梯度凝胶电泳技术相结合的分析方法,研究了不同生物有机肥对不同季节梨园土壤微生物多样性的影响,主要结果如下:(1)采用培养方法,成功获得了289株表型差异的细菌、放线菌和真菌。细菌菌落、菌体形态特征及优势菌的16S rDNA序列分析表明,链霉菌属、芽孢杆菌属、假单胞菌属、微球菌属为主要类群,代表着北京顺义地区土壤细菌的种类。多样性分析显示,部分施肥土壤的微生物群落多样性指数、均匀度指数和丰度均高于对照,处理间的各土壤微生物群落参数差异较大。温度、降水等环境因子亦能影响土壤细菌群落参数和结构,各群落参数与温度、降水量等呈正相关。链霉菌和芽孢杆菌在季节交替过程中一直存在,可能是构成土壤细菌群落的原始种群。(2)应用变性梯度凝胶电泳分析技术研究了12种不同施肥方式对梨园土壤细菌群落多样性和结构稳定性的影响。结果表明,外施不同肥料两年后梨园土壤细菌群落丰富度和多样性指数均有不同程度的提高而群落均匀度均无显著变化,施肥能不同程度地改善土壤细菌群落多样性并维持群落结构相对稳定,其影响程度与施肥种类和施肥量有关,排列顺序为:两种有机肥混施>生物肥与单一有机肥配施>一种有机肥单施。同一小区二次追肥与一次追肥对土壤细菌群落多样性的影响程度相差不大。聚类分析表明,施肥种类相似的土壤其细菌群落结构具有较高的相似性。(3)土壤营养元素测定结果表明,外施肥料对土壤全氮、全磷、有机质及速效钾含量有促进作用,土壤有机质和速效钾的增幅显著大于土壤全氮和全磷。推测是土壤所施不同肥料的养分种类及含量不同所致。同时,不同土壤样品的营养元素含量与对应的微生物数量分布没有相关关系。其原因有待进一步探讨。