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本文对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体的载体构建、表达及鉴定进行了探讨。本研究采用磷酸钙介导法,将质粒pAC-HBs-Fc与线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组杆状病毒,采用蚀斑法纯化重组杆状病毒并进行滴定,其滴度为9×10<5>pfu/ml。用FITC-抗人Fab抗体和FITC-抗人Fc抗体检测转染细胞,均观察到阳性荧光反应,未转染的正常sf9细胞呈阴性反应,表明人源抗-HBsAg的IgG在昆虫细胞中能完整表达;以HBsAg包被ELISA板孔,采用间接法检测培养的上清,结果呈阳性反应,且与HCv抗原、HIV抗原、狂犬病病毒抗原、麻疹病毒抗原和腮腺炎病毒抗原无交叉反应,说明该重组IgG抗体对HBsAg特异性良好。表达产物采用蛋白G亲和层析柱进行纯化,其纯度达97.1%,纯化后的人IgG抗体对重组HBsAg的ELISA试验,证明其具有很好的抗原抗体反应性。测定纯化IgG抗体的蛋白含量,推算人源抗-H.BsAg的IgG抗体在sf9细胞上清中的表达量为0.45mg/L。CHO表达的HBsAg和血源HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。纯化的抗体在β-巯基乙醇还原情况下,进行SDS-PA(讵电泳,可清晰观察到IgG解链后的轻链和重链带,Western-blot分析证明该重组抗体为人源IgG抗体。