人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体的载体构建、表达及初步鉴定

来源 :武汉生物制品研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dragoenix
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体的载体构建、表达及鉴定进行了探讨。本研究采用磷酸钙介导法,将质粒pAC-HBs-Fc与线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组杆状病毒,采用蚀斑法纯化重组杆状病毒并进行滴定,其滴度为9×10<5>pfu/ml。用FITC-抗人Fab抗体和FITC-抗人Fc抗体检测转染细胞,均观察到阳性荧光反应,未转染的正常sf9细胞呈阴性反应,表明人源抗-HBsAg的IgG在昆虫细胞中能完整表达;以HBsAg包被ELISA板孔,采用间接法检测培养的上清,结果呈阳性反应,且与HCv抗原、HIV抗原、狂犬病病毒抗原、麻疹病毒抗原和腮腺炎病毒抗原无交叉反应,说明该重组IgG抗体对HBsAg特异性良好。表达产物采用蛋白G亲和层析柱进行纯化,其纯度达97.1%,纯化后的人IgG抗体对重组HBsAg的ELISA试验,证明其具有很好的抗原抗体反应性。测定纯化IgG抗体的蛋白含量,推算人源抗-H.BsAg的IgG抗体在sf9细胞上清中的表达量为0.45mg/L。CHO表达的HBsAg和血源HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。纯化的抗体在β-巯基乙醇还原情况下,进行SDS-PA(讵电泳,可清晰观察到IgG解链后的轻链和重链带,Western-blot分析证明该重组抗体为人源IgG抗体。
其他文献
全国重点化学矿山环保处(科长)第二届年会于1989年11月17日在金河磷矿结束。会议认真学习了李鹏总理在全国第三次环保会议上的讲话,以及宋健同志的两个讲话、化工部顾秀莲部
当代社会对学校体育的要求,更加关注学生的健康、注重学校体育和终身体育的内在联系、重视学生体育的主体性、关注学生情感智力的发展、注重体育过程本身的教育性、注意学校
黔油双低2号系用Oro×安徽大花种间杂交选育的株系作母本与Altex作父本杂交,经冬播、夏繁定向选育而成的甘蓝型(B.napusL.)双低(低芥酸、低硫甙)油菜新品种。在一般大田生产条件下,亩产100~150kg,高产可达170kg以上。
摘 要: 国内实验经济学教学大多沿袭国外教学模式,嵌入于经济学、管理学等理论课程中进行,用于加深对基础理论知识的理解和掌握,多为演示型、验证性实验。实验中沿袭国外常规教学手段使用纸质教学文件为实验用具,极大地占用了课堂教学时间,在实际教学过程中的运用受到课时等诸多因素的限制,难以开展。作者所在实验中心的软件化博弈教学实践表明,博弈教学软件的使用不但能够极大提高教学效率,而且能够降低教学难度、实现实
本文主旨是为了全面、准确的把握普通大学生体质变化趋势和特点及相关因素对大学生体质变化的影响.采用纵向追踪的研究方法,对绍兴文理学院2008—2012级大学生三个时刻(入学
根据近几年国家出台的对校园足球运动政策,足球运动在校园点燃星星之火.足球运动普及进入校园受到学生的喜爱,随之新时代下校园足球运动会呈现不同模式出现.通过校园足球运动
介绍了基于Compact PCI总线的测控系统的总体设计方案、硬件结构和软件设计。该测控系统具有实时、准确、操作简便、抗冲击振动的特点,为某装置的研制带来极大地便利。 The
摘 要: 传统信息技术课以“计算机 多媒体网络教室软件 投影”的三位一体方式进行教学。教学中教学呆板,缺乏互动,教师被束缚在教师机前,不能灵活操作,课堂只能按预设模式演示,教学时不能根据具体情况灵活、随机地进行编辑加工或删减。交互式电子白板在信息技术课中的应用,让信息技术课发生翻天覆地的变化,实现现代多媒体教学优势的高效整合。  关键词: 信息技术 交互式电子白板 应用  交互式电子白板(Inte
该篇文章采用了文献资料方法、问卷调查法、数据统计方法,对大同市几所中学网球运动的学生动态、参与动机、主要场所、参与时间和次数、场地设施进行了调查.结果表明,大多数