马流行性感冒,是由正粘病毒科流感病毒属马流感病毒所引起的,主要导致马属动物的急性暴发式传染病。近几年来,马流感呈全球流行状态,仅有部分岛国未发病;我国也未能避免,历史上共发生过四次马流感疫情。随着我国马产业逐渐的发展壮大,一旦再次爆发大范围的马流感疫情,将会给我国马产业造成重创。本研究通过对一匹患病马进行病料采集及后续的病毒分离、病毒核酸的提取、RT-PCR、连接T载体等一系列分子生物学技术,最终对病毒核酸进行测序。经测序比对分析,本次研究获得一株H3N8亚型马流感病毒。将获得的毒株与我国分离的A/equine/Jilin/1/1989(H3N3)禽源性毒株、2002年美国肯塔基分离株A/equine/Kentucky/1/02(H3N8)(美洲谱系Florida亚型)、A/equine/Argentine/77(H3N8)(美洲谱系Argentine亚型)这几株有代表性的毒株进行同源性分析后,发现该毒株与Florida-2型的马流感病毒基因片段的同源性最高。根据马流感病毒的命名规则,我们将这株毒命名为A/equine/Heilongjiang/1/2010(H3N8)。本次所分离到的黑龙江株马流感病毒,丰富了我国马流感病毒资源库,为我国马流感流行病学研究、诊断技术及疫苗研究提供了重要基础。为了预防国外流行的Florida-1型马流感病毒传入我国,同时对Florida-1型马流感病毒有基本的了解,本研究复苏了Florida-1型的毒株A/equine/Donegal/1/2009(H3N8),该毒株于2009年在爱尔兰分离得到。经过一系列的试验之后,发现该毒株具有较强的耐受性,其血凝素的热稳定性较好。