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目的:探讨益气扶正复方（YFF）抑制三阴性乳腺癌细胞增殖可能是通过调控Akt/mTOR信号通路来实现,其作用机制与mTOR抑制剂依维莫司（Everolimus）可能有差异或部分重叠。方法:将10,20,40,80,160 mg/m L浓度的益气扶正复方及1,10,100,1000 nmol/L浓度的Everolimus作用于MDA-MB-468细胞12,24,48h,使用M TT比色法分别检测细胞存活率;分别运用IC50浓度的YFF40mg/m L与Everolimus100nmol/L单独及联合干预MDA-MB-468乳腺癌细胞48h,观察其对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术观察细胞周期和细胞凋亡的变化;运用real-time PCR、We stern Blot等方法检测Akt/mTOR通路中Akt、mTOR、PTEN等关键分子基因和蛋白水平以及Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白水平;再采用siRNA干扰技术沉默Akt靶基因,运用Western Blot法观察沉默后Akt/mTOR信号通路中关键蛋白的变化,确认益气扶正复方可能的作用靶点。结果:1.YFF及Everolimus均呈剂量、时间依赖性地抑制了MDA-MB-468乳腺癌细胞增殖,选择IC50浓度的YFF40mg/m L与Everolimus100nmol/L单独及联合干预细胞48h,YFF组、Everolimus组分别使MDA-MB-468乳腺癌细胞存活率降低至54%、51%,YFF与Everolimus联合使用致MDA-MB-468乳腺癌细胞存活率降低至34%,并且两药合用Q值为43.89>1.15,YFF与Everolimus联用具有协同作用,对细胞的增殖抑制作用更为明显（P<0.05）。2.流式细胞术检测YFF组、Everolimus组的细胞凋亡率分别为20%、26%,而联合组细胞凋亡率增加至41%（P<0.05）。3.细胞周期实验显示:与空白对照组相比,YFF组致S期细胞减少了63.8%,Everolimus组减少了66%,联合组减少了72.6%;Everolimus组和联合组分别致G2/M期细胞减少了25.5%和48.4%（P<0.05）。4.Real-time PCR、Western Blot结果显示:YFF组及联合组都能抑制p-mTOR和p-Akt、p-P70s6k的活性、提高了PTEN、p-4EBP-1的表达;同时能明显降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、提高促凋亡蛋白Bax的表达,激活Caspase-3。5.运用siRNA技术将Akt沉默后,YFF组及联合组对PTEN、Akt、mTOR、P70s6k、4EBP-1的调控作用被阻断。结论:益气扶正复方对人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞有增殖抑制作用,YFF与Everolimus联合使用,能增加Everolimus的增殖抑制作用。益气扶正复方与mTO R抑制剂Everolimus作用机制存在部分重叠,能多靶点调控Akt/mTOR信号通路,发挥其抗肿瘤作用,为中医药治疗三阴性乳腺癌提供有价值的实验依据。