无创性产前检测(NIPT)在多胎妊娠中的应用研究

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【目的】探讨无创性产前检测(Non-invasive prenatal testing,NIPT)在多胎妊娠中对于染色体非整倍体异常Trisomy 13(T13)、Trisomy 18(T18)和Trisomy 21(T21)的检测准确性及临床应用的可行性。【材料与方法】1.材料收集:2017年12月到2019年4月就诊于广州医科大学附属第三医院产前诊断与胎儿医学中心门诊的双胎及三胎以上孕妇外周血。同时收集部分单胎妊娠孕妇外周血用于验证实验方法。2.纳入与排除标准:孕周大于9周的双胎妊娠与三胎及以上妊娠孕妇,且需符合NIPT检测的指征,排除1年内接受过异体输血、移植手术、细胞治疗或接受过免疫治疗等对高通量测序产前筛查结果造成干扰的孕妇。3.知情同意:无创性产前检测需征得孕妇同意,并签署知情同意书。4.临床资料收集:详细记录符合纳入标准的就诊孕妇姓名、出生年月、年龄、联系电话、末次月经、孕产次数、此次受孕方式、采样时孕周、不良生育史、超声检查等。5.实验方法:采用Qiagen的试剂盒进行游离DNA的提取;采用Tru Seq Nano DNA Library Prep Kit进行建库等测序前的准备;采用Illumina的测序平台对样本进行测序分析并得出染色体筛查结果。6.验证:通过染色体核型分析/染色体微阵列分析或出生后随访验证NIPT的准确性。【结果】1.本研究共收集双胎妊娠孕妇69例,三胎及以上妊娠孕妇共90例,用于验证实验方法的单胎妊娠203例。孕妇年龄在18岁至48岁之间,平均年龄为31岁。双胎妊娠孕妇47.8%在孕20周前行NIPT检测,三胎妊娠孕妇全部都于孕20周前进行NIPT检测。2.双胎妊娠中的单绒毛膜共44例,占63.8%;双绒毛膜20例,占29.0%。三胎妊娠中的单绒毛膜共8例,占9.4%;双绒毛膜31例,占35.5%,三绒毛膜45例,占52.9%。多胎妊娠受孕方式以人工辅助生殖技术为主。3.双胎妊娠胎儿性别预测总体准确率为98.6%,三胎妊娠胎儿性别预测总体准确率为97.6%。4.在双胎妊娠和三胎及以上的多胎妊娠中共检测出3例高风险病例。一例为T21/T21,一例为T21/正常,一例为T7/正常。5.本研究无假阳性病例和假阴性病例。双胎妊娠NIPT检测染色体非整倍体异常准确率为100%,三胎妊娠检测染色体非整倍体异常特异度和阴性预测值均为100%。【结论】1.NIPT检测多胎妊娠胎儿非整倍体异常准确性高,在临床中应用具有可行性。2.NIPT可检测的时间较侵入性产前手术要早,且属于无创,避免了因侵入性手术引起流产的风险。3.NIPT检测技术局限性在于对于多胎中合并健康胎和异常胎的情况时,无法准确提供是具体哪一胎罹患非整倍体异常,而需要侵入性手术得以确认。
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