荧光光谱法测定安乃近、盐酸丁卡因、肾上腺色腙和卡络磺钠的新方法研究

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本文主要研究安乃近、盐酸丁卡因、肾上腺色腙和卡络磺钠等人体用药与某些芳香族氨基酸和卤代荧光染料的相互作用,以此建立起测定安乃近、盐酸丁卡因、肾上腺色腙和卡络磺钠的荧光光谱法,并将此方法应用于人体血液和尿样的检测。研究内容如下。   1.荧光光谱法研究安乃近及其代谢产物与某些芳香族氨基酸的相互作用及其分析应用   在pH3.2的缓冲介质中,色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)通过静电引力和芳基堆积作用与安乃近(ANG)及其代谢产物4-甲氨基安替比林(MAA)、4-乙酰氨基安替比林(AAA)形成1:1的复合物,引起上述氨基酸的荧光发生猝灭,最大猝灭波长分别位于352nm(ANG-Trp体系)、304nm(ANG-Tyr,MAA-Tyr和AAA-Tyr体系)和284nm(ANG-Phe体系)。其荧光猝灭值(△F)在一定范围内与ANG、MAA和AAA成正比。对于ANG、MAA和AAA的检出限为13.3ng/mL(ANG-Trp体系)、15.8ng/mL(ANG-Tyr体系)、64.5ng/mL(ANG-Phe体系)、150.0 ng/mL,(MAA-Tyr体系)和230.8ng/mL(AAA-Tyr体系),荧光猝灭反应具有较高灵敏度。研究了荧光猝灭反应的适宜条件和影响因素,考察了共存物质的影响,结果表明方法具有良好的选择性,可用于ANG片剂及其代谢物尿药浓度的快速测定。从吸收光谱的变化、温度的影响以及Stern-Volmer作图,判断该反应为静态猝灭反应。   2.荧光光谱法研究盐酸丁卡因与某些芳香族氨基酸的相互作用及其分析应用   在pH6.3的酸性介质中,色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)通过静电引力,芳基堆积作用和范德华力与盐酸丁卡因(TA·HCl)形成1:1的离子缔合物,引起上述氨基酸的荧光发生猝灭,最大的激发(λex)和发射波长(λem)分别位于278、274、258nm和354、306、285nm。其荧光猝灭值(△F)与TA·HCl浓度在0.115~5.0μg/mL(Trp-ANN体系)、0.093~6.0μg/mL(Tyr-ANN体系)和0.452~5.0μg/mL(Phe-ANN体系)范围内呈良好的线性关系。对于TA·HCl的检出限分别为34.5 ng/mL、27.7ng/mL和136.0 ng/mL,研究了荧光猝灭反应的适宜条件、影响因素和共存物质的影响。通过温度的影响、Stern-Volmer作图及荧光衰退时间函数的测定,判断该反应为静态猝灭反应。   3.荧光光谱法研究肾上腺色腙与卤代荧光素染料的相互作用及其分析应用   在pH6.6的缓冲介质中,肾上腺色腙(CBZC)与二氯荧光素(DCF)、二溴荧光素(DBF)、二碘荧光素(DIF)、曙红Y(EY)和荧光桃红B(PB)通过静电引力,芳基堆积作用和范德华力与肾上腺色腙形成1:2的复合物,引起上述卤代荧光素的荧光发生猝灭,最大猝灭波长分别位于533nm、536nm、560nm、545nm和565nm。其荧光猝灭值(△F)在一定范围内与肾上腺色腙浓度成正比,荧光猝灭反应具有较高灵敏度,对于CBZC的检出限分别为3.3ng/mL(CBZC-DCF体系)、5.7ng/mL(CBZC-DBF体系)、129.6 ng/mL(CBZC-DIF体系)、9.1 ng/mL(CBZC-EY体系)和22.7 ng/mL(CBZC-PB体系)。文中考察了共存物质的影响,研究了荧光猝灭反应的适宜条件和影响因素,表明方法具有良好的选择性,可用于CBZC的血药和尿药浓度的快速测定。从温度的影响、荧光衰退时间函数以及Stern-Volmer作图,判断该反应为静态猝灭反应。   4.荧光光谱法研究卡络磺钠与某些芳香族氨基酸的相互作用及其分析应用   在pH3.3的BR.缓冲介质中,卡络磺钠(CSS)与色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)等芳香族氨基酸通过静电引力,芳基堆积作用以及范德华力形成1:1的离子缔合物,引起上述氨基酸的荧光猝灭。最大猝灭波长分别位于352 nm(CSS-Trp体系)、303nm(CSS-Tyr体系)和284nm(CSS-Phe体系),荧光猝灭值(△F)在一定范围内与CSS成正比。荧光猝灭反应具有较高灵敏度,对于CSS的检出限分别为31.3ng/mL(CSS-Trp体系)、44.6ng/mL(CSS-Tyr体系)和315.0ng/mL(CSS-Phe体系)。研究了荧光猝灭反应的适宜条件和影响因素,考察了共存物质的影响,表明方法具有良好的选择性,可用于CSS的血药和尿药浓度的快速测定,结果满意。从双分子猝灭常数Kq,温度的影响以及Stem-Volmer作图,判断该反应为静态猝灭反应。
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