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牛环形泰勒虫病(Theileriosis )是一种血液性原虫病,其病原体是牛环形泰勒虫(Theileria annulata),其主要传播媒介是璃眼蜱。该病是新疆地区常见、多发,影响养牛业发展的疾病。本研究采集新疆7个不同地区的牛全血样品(n=536),以及昌吉地区的牛体表蜱虫(n=273)。使用PCR扩增、贝叶斯聚类、微卫星方法,进行环形泰勒虫病流行病学调查及遗传多样性分析,对环形泰勒虫潜在传播媒介蜱-亚洲璃眼蜱进行系统进化分析。以期为新疆地区牛环形泰勒虫病的综合防控提供理论参考数据。
1.基于Tams1基因所设计的PCR扩增引物对不同分组中的牛环形泰勒虫病原进行检测,发现在不同采样地区中的托克逊地区的牛环形泰勒虫病感染率最高为40.69%;在不同年龄段中1~3年的牛患该病的感染率最高为38.10%;在不同品种中黄牛感染率最高为35.00%。且牛环形泰勒虫病的感染率在不同地区、不同年龄段、不同品种中均存在显著性差异(P<0.05),贝叶斯系统进化表明环形泰勒虫托克逊县地方株和富蕴县地方株之间亲缘关系较远。
2.昌吉地区的硬蜱为亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱,亚洲璃眼蜱COI基因序列同源性比对结果为96.88%,ITS2基因序列同源性比对结果为91.30%。经Blast比对发现,本文所测定的亚洲璃眼蜱COI基因同源性与所上传的COI基因序列(GenBank: MF101817.1)的相似性最高为99.11%,亚洲璃眼蜱ITS2基因与新疆地区的相似性最高为99.13%;基于COI基因对产卵期的蜱虫进行比对分析发现其同源性为98.83%,与中国新疆(登录号:KΜ880606.1)地区的亚洲璃眼蜱同源性最高为100%。系统进化系统进化分析表明,昌吉地区亚洲璃眼蜱的亲缘关系与均其他地区的亲缘关系较远,亚洲璃眼蜱和嗜驼璃眼蜱均具有相对独立的分支。
3.通过微卫星试验结果表明,新疆四个地区牛环形泰勒虫种群中优势等位基因型为TS12,等位基因、有效等位基因等遗传特征参数在托克逊地区最高,最低出现在阜康地区,托克逊地区遗传多样性在四个地区中最丰富,通过哈温平衡分析发现除TS25基因型外,其他7种牛环形泰勒虫基因型在样本中的观测值与期望值存在差异;通过二位柱坐标分析发现,四个不同地区牛环形泰勒虫种群的个体均被分到不同象限内,表现出地理亚结构,且每个种群中均存在基因交流。
本文通过对新疆地区牛环形泰勒虫病的流行病学调查及其传播媒介和环形泰勒虫的遗传多样性进行分析,为牛环形泰勒虫病的动态防控提供理论依据。
1.基于Tams1基因所设计的PCR扩增引物对不同分组中的牛环形泰勒虫病原进行检测,发现在不同采样地区中的托克逊地区的牛环形泰勒虫病感染率最高为40.69%;在不同年龄段中1~3年的牛患该病的感染率最高为38.10%;在不同品种中黄牛感染率最高为35.00%。且牛环形泰勒虫病的感染率在不同地区、不同年龄段、不同品种中均存在显著性差异(P<0.05),贝叶斯系统进化表明环形泰勒虫托克逊县地方株和富蕴县地方株之间亲缘关系较远。
2.昌吉地区的硬蜱为亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱,亚洲璃眼蜱COI基因序列同源性比对结果为96.88%,ITS2基因序列同源性比对结果为91.30%。经Blast比对发现,本文所测定的亚洲璃眼蜱COI基因同源性与所上传的COI基因序列(GenBank: MF101817.1)的相似性最高为99.11%,亚洲璃眼蜱ITS2基因与新疆地区的相似性最高为99.13%;基于COI基因对产卵期的蜱虫进行比对分析发现其同源性为98.83%,与中国新疆(登录号:KΜ880606.1)地区的亚洲璃眼蜱同源性最高为100%。系统进化系统进化分析表明,昌吉地区亚洲璃眼蜱的亲缘关系与均其他地区的亲缘关系较远,亚洲璃眼蜱和嗜驼璃眼蜱均具有相对独立的分支。
3.通过微卫星试验结果表明,新疆四个地区牛环形泰勒虫种群中优势等位基因型为TS12,等位基因、有效等位基因等遗传特征参数在托克逊地区最高,最低出现在阜康地区,托克逊地区遗传多样性在四个地区中最丰富,通过哈温平衡分析发现除TS25基因型外,其他7种牛环形泰勒虫基因型在样本中的观测值与期望值存在差异;通过二位柱坐标分析发现,四个不同地区牛环形泰勒虫种群的个体均被分到不同象限内,表现出地理亚结构,且每个种群中均存在基因交流。
本文通过对新疆地区牛环形泰勒虫病的流行病学调查及其传播媒介和环形泰勒虫的遗传多样性进行分析,为牛环形泰勒虫病的动态防控提供理论依据。