肾病综合征中医证型分布及相关实验研究

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目的:探索中医证候在肾病综合征中的分布特点,观察肾病综合征中医证型与实验室指标的相关性,并结合相关动物实验结果,探讨赖诺普利对肾病综合征疾病的防治作用。方法:临床研究:收集广州中医药大学附属深圳医院肾病科2011年1月至2012年6月间,确诊为肾病综合征的85例患者的一般情况、临床证候和实验室指标,采用回顾性调查分析方法进行中医分型及中医证候的相关性研究。实验研究:根据临床研究结果,模拟肾病综合征常见中医证型,建立“湿热证”肾病综合征大鼠模型----盐酸阿霉素诱导肾病综合征模型。予采用一次性尾静脉注射阿霉素(2mg/kg),将成模大鼠随机分为肾病综合征模型组(以下简称,模型组)赖诺普利灌胃治疗组(以下简称,治疗组),另外选取15只正常大鼠为正常对照组(以下简称,正常组)。其中正常组和肾病综合征模型组予生理盐水每日灌胃,治疗组予赖诺普利10mg·kg-1·d-1灌胃。共用药干预24周。赖诺普利溶解于蒸馏水中。灌胃的剂量根据大鼠体重每周调整。所有大鼠自由饮食和饮水。动物饲养室恒温25℃,昼夜各12小时。于灌胃0w、2w、4w、6w、8w、10w、12w、14w、16w、18w、20w、24w末收集尿标本,并于灌胃12w、24w末测血压、收集血及肾组织标本,检测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血白蛋白(ALB)、血总蛋白(TP)胆固醇(TG)、血清总胆固醇(CHOL)及24h尿蛋白定量(24h Pro);石蜡切片行PAS染色和免疫组化染色,肾脏肾胺酶用Western-blot法检测,观察肾组织肾胺酶表达情况。结果用均数±标准差(x±s)表示,两组以上均数比较采用单因素方差分析,其后进行的两者之间比较应用最小极差分析。通过SPSS-16.0统计软件处理,以P<0.05为有显著性差异的标准。结果:临床研究:1.肾综病人群中,湿热证组平均患病年龄最年轻,为(34.93+16.06岁),脾肾阳虚证组发病年龄最大,为(50.56±9.58岁)。湿热证组占29例(34.12%),出现的比率较其他主证高。2.湿热证组24hPRO、CHO-L较非湿热证明显升高,差异有显著性(,P<0.005)湿热证组血清ALB较上述各非湿热证组明显下降,有显著性差异(P<0.05)。TP、TG、Scr、BUN各组比较无显著性差异(P>0.05)3.肾综病人群中,血压水平湿热组高于其它证型组,差异有显著性(P<0.05)。实验研究(1)12w末,模型组大鼠蛋白尿明显高于正常组(P<0.05),治疗组有降低尿蛋白的作用,且与模型组相比均有统计学意义(P<0.05)24w末,模型组大鼠较正常对照组大鼠24h尿微量白蛋白均有显著升高(P<0.05)。模型组大鼠血压均较正常组大鼠降低(P<0.05),治疗组大鼠较模型组血压降低有统计学意义(P<0.05)(2)12w末,模型组大鼠的血清ALB、TG均较正常组大鼠降低(P<0.05),而模型组大鼠ALB较治疗组大鼠降低(P<0.05)。24w后模型组大鼠的ALB、BUN均较正常组大鼠较低,正常、模型及治疗组之间Scr、UA、TG、TP差异不明显。(3)病理组织学PAS染色结果显示,12w末模型组大鼠持续局灶性干酪硬化改变在肾小球内,肾小球折叠和管腔闭合,透明蛋白沉积在肾小球和肾小球囊粘连,肾小管间质区有肾小管萎缩和扩张,与模型组比较,赖诺普利能改善这些变化。Masson染色结果显示,模型组、治疗组较正常组大鼠肾小球系膜区、肾小管间质胶原沉积具有明显增加。(4)免疫组织化学12w末,在正常组大鼠肾脏中,肾胺酶主要表达在近端肾小管,而在肾小球中较少表达。与正常组比较,模型组大鼠中肾胺酶较少表达在模型组大鼠近端肾小管和肾小球。与模型组相比较,治疗组大鼠肾脏近端肾小管和肾小球的肾胺酶表达明显增多,差异有显著性(P<0.05)。(5) Western Blot12w末,Western blot结果显示,与正常组、治疗组比较,模型组大鼠肾组织肾胺酶表达水平明显较少,差异有显著性(P<0.05)。结论:1.肾综患者人群中,湿热证组平均患病年龄最年轻,湿热证是肾病综合征的中医主要证型,并且湿热证型的肾病综合征患者病情较重。2.赖诺普利可显著减少实验性肾病综合征大鼠肾脏肾小球硬化和肾小管损伤,减少蛋白尿的生成水平。3.赖诺普利可显著上调实验性肾病综合征大鼠肾脏肾胺酶表达,从而起到保护肾脏作用。
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