论文部分内容阅读
我国具有丰富的食用菌资源,食用菌在我国的使用历史已有上千年。多糖是菌类植物的有效成分之一,具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性,因此研究菌类植物多糖便具有重要的现实意义。本文选取两种珍稀食用菌鸡腿菇和滑子菇为材料,对其多糖成分进行了一系列体外活性等研究：1、对鸡腿菇采取不同的提取方法进行多糖的提取：分别采用热水浸提法得到水提鸡腿菇多糖WCP；超声辅助提取法得到超提鸡腿菇多糖UCP,对超提鸡腿菇多糖采用季铵盐沉淀法进行纯化分离,取其中性组分UCP-2和酸性组分UCP-3；对水提的鸡腿菇多糖进行硫酸酯化修饰和羧甲基化修饰,得到硫酸酯化鸡腿菇多糖SWCP和羧甲基化鸡腿菇多糖CWCP。对上述五种鸡腿菇多糖进行红外光谱扫描表征其官能团结构,运用MTT法研究它们对人白血病K562细胞的体外增殖抑制活性。试验结果表明：鸡腿菇多糖可抑制K562细胞的体外生长,并且抑制作用随着多糖浓度和作用时间的变化而变化；经过不同的化学工艺得到的鸡腿菇多糖体外抑制K562细胞生长的抑制活性不同；提取方法不同影响多糖的活性表达,超声处理多糖可能引起了单糖之间连接方式变化进而使得其生物活性发生改变；化学修饰可改变多糖的官能团从而影响其活性,硫酸酯化修饰与羧甲基化修饰的鸡腿菇多糖对K562细胞的体外生长抑制作用明显,对鸡腿菇多糖进行化学修饰有助于提高其生物活性。2、对滑子菇采取传统的水提醇沉法提取滑子菇多糖PNP,为了研究滑子菇水提粗多糖(PNP)的体外生物活性,对滑子菇多糖的总还原力、清除1,1-二苯基-2苦苯肼自由基(DPPH·)和由Fe2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用进行研究,采用MTT比色法和台盼蓝细胞计数检测对滑子菇水提粗多糖的体外抑制K562细胞生长作用进行了研究,并进行了流式细胞周期检测。结果表明：滑子菇水提粗多糖PNP在高浓度g/mL)时具有接近于Vc清除DPPH·的能力,高达41.28%；PNP对Fe2+诱发的脂质过氧化反应具有一定的抑制作用,并且随着浓度的增加抑制作用逐渐增强,但总的增长趋势不大；MTT实验表明PNP对K562细胞的体外增长有抑制作用,在浓度为800μg/mL和作用时间为48h时可达到最高的抑制率35.03%,流式细胞术对细胞周期的检测表明滑子菇多糖能够阻滞人白血病K562细胞于G1期。3、运用化学修饰的方法对滑子菇多糖进行硫酸酯化结构修饰,对修饰后的滑子菇多糖进行红外光谱扫描,硫酸化修饰的滑子菇多糖的红外光谱图在1235.32cm-1附近出现了硫酸基—O—SO3—的S=O伸缩振动特征吸收峰,对该多糖体外抑制肿瘤细胞K562增殖抑制活性进行研究,结果表明：同水提滑子菇粗多糖体外抑制K562细胞增殖活性相比,经过硫酸化修饰的滑子菇多糖在各个作用时间内均表现出抑制活性,其抑制活性随着多糖浓度的增加先增大后减小,随着作用时间的推移先增强后降低。