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环境雌激素会对人体健康和野生动物的生殖与发育产生严重危害，它们不仅来自天然生物体和人工化合物，还可能产生于水处理过程，如消毒就可能产生新的雌激素活性的消毒副产物。通过传统的分离检测方法可以对未知的雌激素活性消毒副产物进行鉴定，但目前分离纯化的困难很大检测效率很低，这就需要一种更有效的分离检测方法。目前大部分已知的环境雌激素都是通过与受体结合产生内分泌干扰效应的。基于这一原理，本课题通过制备雌激素受体的亲和柱，结合高效液相色谱（HPLC）和质谱等对雌激素氯消毒后生成的雌激素活性消毒副产物进行分离鉴定，并对其雌激素活性和生成规律进行了研究，本课题内容从一下四个方面展开。首先，研究发现使用新转化的菌种、在15℃含有15%蔗糖的LB培养基中诱导表达受体蛋白，以及超声破碎5min所制备的受体亲和柱的效果最好。第二，通过雌二醇（E2）等典型的环境雌激素检测受体亲和柱对雌激素的分离回收效率大约为60~70%。同时发现受体亲和柱会优先分离纯化样品中与受体结合能力强的配体，以此设计了基于受体亲和柱的配体竞争实验，检测了环境雌激素与受体的相对结合能力，并发现其与雌激素活性存在正相关关系。第三，利用受体亲和柱结合HPLC对E2、双酚A（BPA）和己烯雌酚（DES）的氯消毒产物进行分离，鉴定出了氯代E1、氯代E2和氯代BPA等已报道的雌激素活性消毒副产物，以及双烯雌酚（DE）、氯代DES和氯代DE等未知的雌激素活性消毒副产物，并在双杂交酵母实验中对这些消毒副产物的雌激素活性进行了分析。第四，研究了消毒时间和溴离子对DES氯消毒副产物及其雌激素活性的影响，发现延长消毒时间和提高溴离子都可提高氯消毒对DES及其消毒副产物的去除效率，不过溴离子可能会导致新的含溴消毒副产物的产生。综上所述，本课题建立了一种能高效分离鉴定未知雌激素活性消毒副产物的新方法，并能估测这些物质的相对雌激素活性，发现了DES的五个未知的雌激素活性消毒副产物以及它们的生成规律，为环境雌激素的研究控制提供新的技术方法和科学依据。