在本文的研究中,从实验室已构建的文库中获得L-LECT2全长EST序列,L-LECT2是由全长cDNA序列中含有606-bp ORF编码的201个氨基酸组成。对L-LECT2氨基酸序列进行生物信息学分析得到了有关L-LECT2结构、功能、理化性质、进化等重要的数据。对目的基因调取后,克隆构建了分别以p EGFP-N1和pc DNA3.1为载体的两个真核重组质粒及以p ColdΙ为载体的原核重组质粒,在真核宿主细胞中验证了L-LECT2定位于细胞质,在原核宿主菌中表达了原核rL-LECT2蛋白,大量纯化了原核rL-LECT2蛋白,同时做了多克隆抗体并验证测定了抗体特异性和效价。通过免疫荧光、免疫组化、实时定量QPCR、免疫印迹、流式分析手段对L-LECT2定位研究,结果发现L-LECT2蛋白主要定位分布在七鳃鳗的白细胞、肠、神经轴体组织中,并在白细胞的分泌液中检测到L-LECT2蛋白。功能研究方面,本文通过划痕和Trans Well实验证明了重组rL-LECT2蛋白能够显著抑制癌细胞体外的迁移。经流式分析,rL-LECT2蛋白可以趋化RAW264.7细胞吞噬荧光微球及细菌,同时用q PCR检测到RAW264.7细胞TNF-α和C3的m RNA表达上调。通过Trans well实验证明了rL-LECT2能够显著趋化七鳃鳗白细胞在体外迁移,流式分析rL-LECT2能够对七鳃鳗白细胞的有趋化吞噬细菌(E.coli-FITC)作用,并确定吞噬细菌的细胞类群。因此,我们的研究结果表明rL-LECT2可以促进七鳃鳗白细胞的迁移和介导单核细胞/巨噬细胞防御大肠杆菌,进而对宿主的抗菌保护。