人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)是一类双链小分子DNA病毒,具有多种基因型,有严格的种属特异性,主要感染人类皮肤和粘膜的上皮组织,引起相应部位的增生性病变。到目前为止已证实的HPV基因型有100多种,根据其致病性高低又分为低危型和高危型。低危型主要在尖锐湿疣组织中发现,如HPV6、HPV11,高危型则在宫颈癌组织中发现,如HPV16、HPV18、HPV31、HPV33等,其中以HPV16型的感染最为普遍。目前在99.7%的宫颈癌组织中发现了HPV DNA,说明HPV感染与宫颈癌的发生密切相关。HPV衣壳蛋白由主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2组成,L2蛋白在所有的HPV中均有表达,且具有很强的序列保守性,可与多种型别的HPV发生交叉中和反应,是目前HPV亚单位疫苗研究的热点。AP205是一种RNA噬菌体的主要衣壳蛋白,180个AP205单体可自行组装成一类新的具有高度免疫原性的病毒样颗粒(VLP),这些VLP不含有噬菌体RNA基因组因而不能复制。AP205还可携带目的抗原片段,组装形成VLP后可有效提高目的抗原的免疫原性。本研究合成了编码AP205衣壳蛋白基因和HPV16L2的65-71、112-120位氨基酸表位的基因序列,PCR连接并克隆至pET30a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET30-AP205-HPV16△L2,转化大肠杆菌BL21(DH3)感受态细胞,IPTG诱导表达。将表达蛋白凝胶层析纯化及通过SDS-PAGE、Western blot等理化性质检测后,免疫接种ICR小鼠,然后通过间接ELISA法检测其免疫原性。结果显示,重组蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达,透射电镜观察可见典型病毒样颗粒,该VLP在动物实验中表现出较好的免疫原性。