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第一部分胸腺素β4在急性胰腺炎患者血清中水平的变化及意义目的：探讨胸腺素β4 （thymosin β4, Tβ4）在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）及轻型急性胰腺炎（mild acute pancreatitis, MAP）患者血清中水平的变化及意义。方法：收集2012年1月至2013年11月于武汉大学人民医院肝胆腔镜外科、消化内科及重症医学科急性胰腺炎患者的血样标本。其中诊断为重症急性胰腺炎患者36例,轻型急性胰腺炎患者40例,分别于入院后当天（第1天）及第14天留取血样标本。以武汉大学人民医院行常规体检健康者20人为正常对照组,对照组仅留取1次血样标本。所有血样标本以3000rpm离心15分钟,留取血清于-80℃冰箱冻存。采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清样本中胸腺素β4水平。同时收集患者的病例资料,并根据患者入院时的病情进行APACHE Ⅱ评分。结果：入院第1天,急性胰腺炎（包括SAP和MAP）患者血清胸腺素β4水平明显高于正常对照组（P<0.05）。胸腺素p4在MAP患者血清中高于正常对照组（P<0.05）,但明显低于SAP组患者（P<0.05）。入院当天急性胰腺炎患者血清胸腺素β4水平与患者APACHE Ⅱ评分呈正相关。血清中胸腺素β4水平较高的患者较胸腺素β4水平较低的患者更容易发生器官功能障碍（P<0.05）。但经过治疗后的第14天,MAP与SAP患者血清中胸腺素β4水平较入院第1天略升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：胸腺素β4水平在急性胰腺炎患者血清中升高。特别是SAP患者血清中胸腺素β4水平明显升高,与患者的预后相关,这提示胸腺素β4在急性胰腺炎发生的病理生理过程中可能起着重要作用。第二部分胸腺素β4在重症胰腺炎大鼠模型中水平的变化及意义目的：探讨胸腺素β4 (thymosin （34, Tβ4）在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）大鼠模型各时间点（3h、6h、12h）血清中水平的变化及意义。方法：SPF级雄性SD大鼠70只,体重180-200g,随机分为3组：正常对照组（control group, CON组,N=10只）、假手术组（sham operated group, SO 组,N=30只）和重症急性胰腺炎组（severe acute pancreatitis group, SAP组,N=30只）。采用异氟烷吸入性麻醉药进行诱导麻醉（浓度：5%；流量：2L/min）和维持麻醉（浓度：2-3%；流量：2L/min）,逆行胰胆管穿刺注射5%的牛磺胆酸钠溶液（sodium taurocholate, STC） （1 ml/kg）制备大鼠重症急性胰腺炎模型。而正常对照组无需任何处理,假手术组仅翻动十二指肠及胰腺后关腹。SAP组大鼠分别于造模后3h、6h、12h下腔静脉采血（各时间点10只大鼠）,CON组大鼠直接剖杀采血,SO组大鼠于假手术术后12h采血,血样经3000rpm离心15分钟后留取血清。采用全自动生化分析仪检测上述各组大鼠血清淀粉酶（amylase, AMY）水平。胰头部组织行HE染色,观察其病理学改变并评分。采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清样本中胸腺素β4和IL-1β水平。并将血清胸腺素β4水平与AMY、IL-1β及胰腺病理评分进行相关性分析。结果：SAP组大鼠血清淀粉酶水平在3h、6h、12h均较对照组明显升高（P<0.05）。SAP组大鼠胰腺组织病理染色结果在光镜均可见相应病理改变（如水肿、炎症细胞浸润、空泡化、坏死等）,其在各时间点的病理评分均显著高于对照组（P<0.05）。SAP组大鼠血清AMY、胸腺素p4和IL-1p水平在造模成功后开始升高,在所观察到的12h时达到最高,各时间点SAP组大鼠血清AMY、胸腺素β4和IL-1p水平均高于对照组（P<0.05）。相关性检测结果提示各时间点胸腺素β4水平与AMY、IL-1p和胰腺病理评分呈正相关,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：血清胸腺素β4在大鼠重症急性胰腺炎时显著升高与其病情严重程度相关,采用胆盐诱导重症急性胰腺炎的造模方法可作为相对合适的动物模型来进一步研究胸腺素β4在急性胰腺炎中的作用。第三部分重组胸腺素β4对重症急性胰腺炎大鼠胰腺的保护作用目的：探讨重组胸腺素β4 （thymosin β4, Tβ4）腹腔注射给药对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）大鼠模型胰腺的保护作用及其机制的研究。方法：SPF级雄性SD大鼠72只,随机分为3组：假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（SAP组）、胸腺素β4预处理组（Tβ4组）,每组24只。采用5%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠重症急性胰腺炎模型,Tβ4组在造模前30min经腹腔注射胸腺素β4 （6mg/kg）,术后在3h、6h、12h时间点分批剖杀大鼠,各时间点8只。采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶（amylyse, AMY）、脂肪酶（lipase, LIP）水平；采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清TNF-α、IL-1β及IL-6水平；中性粒细胞髓过氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）活性测定试剂盒检测胰腺MPO活性水平；光镜观察胰头部组织病理学变化；免疫组织化学方法对NF-κB p65蛋白进行定位检测；Western blot检测胰腺组织NF-kB p65和IkB α及ICAM-1蛋白表达水平。结果：SAP组大鼠血清AMY、LIP、TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及胰腺组织MPO活性水平和病理评分随着时间的延长均逐渐升高（P<0.05）,上述指标在各时间点（3h、6h、12h）均较SO组升高（P<0.05）,而Tβ4组的上述指标在各时间点均较SAP组降低,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学结果显示：NF-kB p65蛋白在SAP组中的表达较SO组增强,且主要表达在细胞核内,而NF-kB p65蛋白在Tp4组细胞核中的表达较SAP组明显减少。SO组12h时间点胰腺组织NF-kB p65蛋白的相对表达量显著低于SAP（]2h）组（P<0.05）,Tβ4组胰腺组织NF-KB p65蛋白的相对表达量也较SAP组12h时间点显著降低（P<0.05）。SO组12h时间点胰腺组织IKB α蛋白的相对表达量显著高于SAP组12h时间点（P<0.05）,而SAP组12h时间点胰腺组织IκB α蛋白的相对表达量较Tβ4组12h时间显著降低（P<0.05）。SAP组12h时间点胰腺组织中ICAM-1蛋白的表达较SO组明显增强（P<0.05）,而Tβ4预处理组12时间点胰腺组织中ICAM-1蛋白的表达较SO组12h时间点明显减弱（P<0.05）。结论：胸腺素β4可能通过抑制胰腺NF-κB炎症信号通路的活化及中性粒细胞的募集,进一步抑制其下游炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1）的释放,从而有效减轻胰腺的炎症反应及其病理损伤,延缓重症急性胰腺炎病情的进展。