本实验通过免疫组织化学方法检测了大肠癌组织中RON的表达水平，并对这些术后病例进行长期随访，以分析RON表达和大肠癌临床病理分期和预后的关系。 手术标本：随机收取浙江大学医学院附属邵逸夫医院1999年8月至2005年4月间的大肠癌根治切除术手术标本； 试剂：兔抗人RON抗体，即用型免疫组织化学超敏S-P试剂盒； 仪器：HPIAS-100高清晰度彩色病理图文分析系统9.0及配套显微镜等。 实验方法和步骤： 1.全部组织标本以10％甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片后进行免疫组化染色。本实验采用链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法(S-P法)，按照S-P试剂盒所附说明书操作。一抗作用时间为室温条件下0.5h，稀释浓度为1：50。设立转染RON的NIH-3T3细胞为阳性对照，以PBS代替一抗作为空白对照。 2.镜下观察肿瘤细胞胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性染色，整张玻片内肿瘤组织区域分为20个区，每个区内随机取1个镜下视野(100×)，采用HPIAS-100高清晰度彩色病理图文分析系统对镜下采取的图像进行分析，记录视野内胞浆染色区灰度值，求20个区的平均数作为该肿瘤的平均灰度值。其中染色强度越高，灰度值越小。 3.采用SPSS10.0软件包进行统计，计量资料采用Dunnett’sT3检验进行单因素方差分析，研究RON表达强度和大肠癌临床病理分期之间的关系。 4.对纳入实验的病例进行临床随访，统计3年生存率，并采用Kaplain-Meier模型分析可能对大肠癌术后生存期产生影响的临床因素。 研究结果与讨论： 1.RON在不同大肠组织中的表达：RON在正常大肠粘膜、大肠腺瘤、大肠癌组织中均见阳性表达。且在大肠腺瘤及大肠癌中的表达强度高于正常大肠粘膜(P＜0.05)。但大肠腺瘤与大肠癌组织间RON的表达强度之间差异无统计学意义(P＞0.05)。提示在上皮性肿瘤细胞中RON的表达发生了改变，其异常变化可能参与了由正常大肠上皮到大肠肿瘤的恶性变过程。且癌组织和腺瘤之间RON表达无明显差异，提示RON在肿瘤发生早期即开始起作用。 2.RON的表达与大肠癌临床病理分期的关系：在高，中，低分化等不同分化程度的大肠癌组织中，RON的表达强度虽然逐步上升，但差异无统计学意义(P＞0.05)，在不同浸润深度的大肠癌组织中，RON的表达随着浸润层次的深入而增强(P＜0.05)，且RON的表达和大肠癌的淋巴结转移及Duke’s分期有关，其表达强度随淋巴结转移和Duke’s分期的升高而增高(P＜0.05)，但C期与D期之间差异无统计学意义(P＞0.05)。提示RON的过表达可能在肿瘤的浸润转移过程中起一定作用，且RON表达强度随病理分期升高而增加，也支持了RON和大肠癌侵袭转移相关的观点。 3.RON表达和大肠癌预后的关系：大肠癌术后平均总生存期为(31.5±2.2)个月，无瘤生存期为(27.5±2.2)个月。3年总生存率为77.21％，无瘤生存率为76.05％。Kaplain-Meier分析显示RON的表达值的强弱对术后生存期无明显影响(P＞0.05)，除此之外，Duke’s分期和淋巴结转移对总生存期和无瘤生存期有显著影响(P＜0.05)，而浸润深度，分化程度对生存期无明显影响(P＞0.05)。 研究结论： 1.RON在不同大肠组织中均有表达，且大肠肿瘤中RON的表达要高于正常大肠上皮。 2.RON在大肠癌中的表达随病理分期升高而增强。 3.RON和大肠癌的发生和侵袭进展密切相关。 4.RON对大肠癌术后生存期无明显影响。