第一部分HPLC法测定脱氧土霉素生物可降解支架体外释放率研究目的建立测定脱氧土霉素生物可降解支架体外释放液中药物浓度的方法(HPLC法)；使用该法明确脱氧土霉素生物可降解支架在体外的药物释放模式。研究方法将脱氧土霉素生物可降解支架置于105mlPBS液中,每日固定时间点将释放介质取出50m1作为样品待检测,并再加入新鲜的等量的释放介质继续释放实验,直至释放终点。HPLC测得样品中脱氧土霉素含量。色谱条件：流动相：5%乙酸-乙腈-甲醇(55∶25∶20),流速为1ml/min,检测波长为347nm,柱温为35℃,进样体积10u1,分析时间10min,保留时间3.9min。结果本法在0.5-4ug/ml间线性良好,相关系数0.9862。药物总释放量均值为11.595ug。第1天的释放率即高达77.24%；第3天的累计释放率为87.08%；第7天累计释放率已达97.4%；第13天起停止释放。结论载药量为lmg的脱氧土霉素生物可降解支架在体外PBS溶液中释放模式符合实验设计的目的和预期。第二部分脱氧土霉素生物可降解支架的体外毒性实验研究研究目的观察脱氧土霉素生物可降解支架在体外对成纤维细胞的毒性作用。研究方法制备脱氧土霉素生物可降解支架72小时浸提液,体外培养成纤维细胞48小时,显微镜观察细胞形态变化,MTT法进行体外细胞毒性试验,流式细胞术检测成纤维细胞周期和凋亡率改变。阴性对照组为纯细胞培养基。结果成纤维细胞培养48小时后,显微镜下观察浸提液实验组成纤维细胞的形态与结构未发现明显改变；MTT法检测实验组成纤维细胞的OD570值较对照组略减低,组间比较无统计学差异；实验组细胞相对增值率96.5%,细胞毒性程度I级；流式细胞术检测实验组G2期细胞比例未发生明显改变,双标记流式细胞术检测实验组成纤维细胞凋亡率无明显改变。结论脱氧土霉素生物可降解支架对成纤维细胞的形态、生长代谢和增殖不构成明显损害,满足体内植入的要求,为进一步的动物实验提供了理论依据。第三部分脱氧土霉素生物可降解支架对猪结肠吻合口愈合的影响研究目的观察脱氧土霉素生物可降解支架对猪结肠吻合口愈合过程的影响,评价该支架应用于结肠吻合的安全性和有效性。研究方法48只巴马小型猪随机分为三组进行结肠吻合：脱氧土霉素生物可降解支架组(DS组)、左旋聚乳酸支架组(PS)和手工缝合组(HS)。术后四个时间点(3天、7天、14天、30天)随机处死动物并取材,观察吻合口愈合大体情况,测定吻合口爆破压。吻合口组织行HE染色、Masson染色观察组织病理学改变,进行TGF-β1、bFGF、α-SMA、CD31免疫组化染色,并测定其羟脯氨酸含量。以HS组为对照,行荧光定量PCR检测MMP-2与MMP-9mRNA相对表达倍数。研究结果所有手术均顺利完成,无术中死亡,HS组14D标本中有1例死于肠瘘,DS组麻醉过量死亡1例；余无腹腔脓肿、无肠瘘、无肠梗阻发生。术后3天、7天PS组和DS组爆破压明显高于HS组,但PS组和DS组之间比较无明显差异。吻合术后14天、30天三组之间爆破压无明显差异。HE染色和Masson染色中三组愈合过程相似,DS组和PS组较HS组炎症反应轻,胶原沉积增多。术后30天创面完全愈合,未发现DS组对结肠粘膜的损伤。免疫组化染色结果三组差异不明显,TGF-β1和bFGF呈现逐渐下降趋势,α-SMA和CD31呈先上升再下降趋势。三组3天起羟脯氨酸含量逐渐上升高,各时间点组间比较无明显差异。DS组在术后3天及7天时MMP-2mRNA相对表达倍数较PS组明显降低,余时间点无明显区别。DS组和PS组MMP-9mRNA相对表达倍数无统计学差异。结论脱氧土霉素生物可降解支架应用于猪结肠吻合安全可靠,对结肠粘膜无明显毒性作用；脱氧土霉素生物可降解支架在术后早期可抑制MMP-2mRNA表达,提高吻合口爆破压,促进结肠吻合口愈合。