穴位电刺激对围术期大鼠脊柱后路手术抗原呈递细胞的影响研究

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目的:观察穴位电刺激对围术期脊柱后路手术抗原呈递细胞的影响。方法:健康雄性SD大鼠40只,体重约300-350g,随机分为5组,每组8只,分别为疏密波组、连续波组、非经非穴组、手术麻醉组和空白组,五组同期进行实验。空白组不行手术与麻醉,实验期间自由进食饮水,采集标本时间同其他四组。手术麻醉组、疏密波组、连续波组、非经非穴组均行腰部正中后路L3-L4部位手术,手术在20min内完成。疏密波组、连续波组麻醉后术前、术中在双侧“足三里”、“三阴交”电针刺激,非经非穴组在双侧“足三里”、“三阴交”旁开1-2mm电针刺激,术前、术中共电针刺激30min;疏密波组、连续波组术后第1天、第2天在双侧“内关”、“太冲穴”、非经非穴组在双侧“内关”、“太冲穴”旁开1-2mm予以电针刺激30min。强度以大鼠双下肢轻微抖动为度。疏密波组和非经非穴组术前电针刺激频率为2/15Hz,持续时间l0min,l0min后将刺激参数调成2/10Hz并开始手术,强度同术前,维持时间20min,造模后第1~2天电针刺激参数为2/15Hz。连续波组术前术中和术后第1天、第2天电针刺激参数均为15Hz。手术麻醉组不予以电针刺激。所有组均于术后2h,24h,48h时间点,观察大鼠皮毛光泽、神态、后肢活动情况和伤口愈合情况,测量体温并记录。手术麻醉组、疏密波组、连续波组、非经非穴组手术第2天处死采集脾脏。将所得样本制成脾细胞悬液,使用流式细胞仪检测MHC-Ⅱ+、CD80+MHC-Ⅱ+、CD86+MHC-Ⅱ+、CD103+、CD11+细胞数。结果:术前、术后48小时体温,术后24小时各手术及电针组毛发情况、术后48小时毛发情况,神态情况对比均无明显差异。疏密波组术后24小时体温较空白组降低,有统计意义(P<0.05)。术后24小时疏密波组有一只实验动物BBB评分小于21分,该动物术后48小时活动正常,步态、后肢活动未见明显异常。所有手术动物术后切口均为一期愈合,未见切口有明显感染、渗液等。与空白组相比,手术麻醉组、非经非穴组MHC-Ⅱ阳性细胞表达水平均降低(P<0.05),疏密波组、非经非穴组CD86+阳性细胞表达水平均降低(P<0.05)。手术麻醉组CD80+阳性细胞表达水平升高(P<0.05)。非经非穴组MHC-Ⅱ、CD86+、CD103+、CD11+CD103+均降低(P<0.05)。连续波组 MHC-Ⅱ、CD86+、CD80、CD103+、CD11+CD103+无明显差异。与手术麻醉组相比,疏密波组、连续波组、非经非穴组MHC-Ⅱ阳性细胞的表达均增加(P<0.05),CD80+MHC-Ⅱ+阳性细胞表达均减少(P<0.05)。疏密波组、非经非穴组CD86+阳性细胞表达均减少。疏密波组CD103阳性细胞表达增加(P<0.05)。连续波组CD11+CD103+阳性细胞减少(P<0.05)。疏密波组与连续波组相比,MHC-Ⅱ阳性细胞、CD80+MHC-Ⅱ+阳性细胞、CD86+MHC-Ⅱ+阳性细胞、CD103阳性细胞、CD11+CD103+阳性细胞差异均无统计学意义。疏密波组与非经非穴相比,非经非穴组CD86+MHC-Ⅱ、阳性细胞表达减少,差异有统计学意义(P=0.015,P<0.05);CD11+CD103+阳性细胞表达减少,差异有统计学意义(P=0.020,P<0.05);MHC-Ⅱ阳性细胞、CD80+MHC-Ⅱ+阳性细胞、CD103阳性细胞均无统计学差异。结论:手术创伤应激对抗原呈递细胞成熟有抑制作用。围手术期电刺激可以减轻手术创伤应激对抗原呈递细胞成熟的抑制作用。
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