脂肪组织是动物和人体最大的能量储备系统,是糖脂代谢的重要场所。脂肪细胞对血糖的调节主要受insulin/IR/IRS1/PI3K/GLUT4信号途径影响,而micro RNAs(miRNAs)参与了脂肪细胞的一系列生理过程。在本课题组前期研究中,ssc-miR-146b极显著降低了猪脂肪细胞对葡萄糖的转运,因此本文以猪原代脂肪细胞为研究对象,探究ssc-miR-146b对猪脂肪细胞葡萄糖转运相关蛋白的影响及其分子机制。首先采用生物信息学方法预测ssc-miR-146b的靶基因,然后采用Westernblot、双荧光素酶报告基因等方法进行验证,并在细胞上进行相关的功能分析。研究结果如下:1.KEGG分析结果显示ssc-miR-146b参与了脂肪细胞因子信号转导通路,TargetScan靶基因预测结果中包含GLUT4、IRS1。2.ssc-miR-146b mimics/NC/inhibitor/iNC分别转染猪脂肪细胞后,Western blot结果显示ssc-miR-146b对GLUT4蛋白有下调作用,pmirGLO双荧光素酶载体结果表明ssc-miR-146b并不靶向GLUT4,但靶向IRS1。3.构建的ssc-miR-146b三个突变体与pGLO-IRS1共转后,双荧光素酶报告基因载体检测结果显示突变体1、2仍能靶向IRS1,而突变体3则不能靶向IRS1,说明第18和21位的碱基是决定ssc-miR-146b靶向IRS1的关键碱基。综上所述,本研究验证了ssc-miR-146b通过靶向IRS1,降低GLUT4的表达水平,从而抑制猪脂肪细胞对葡萄糖的转运。