内皮素3对恶性黑素瘤A375细胞上皮基质转化的影响

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[目的]研究内皮素-3(Endothelin 3, ET-3)对人恶性黑素瘤A375细胞上皮基质转化(Epithelial-to-Mesenchymal Transition, EMT)的影响。[方法]体外培养A375细胞株,分别设立不同干预组,A:空白对照组;B:加入ET-3(100nmol/l);C:加入ETRB阻断剂BQ788组( 100nmol/LET3+100μmol/LBQ788 );采用Transwell小室检测细胞的转移,细胞爬片技术检测细胞形态的变化,采用Realtime-PCR和Western Blot检测上皮基质转化相关分子E-cadherin、vimentin及转录因子(Twist、Slug)的表达情况。[结果]各干预条件中:1)ET-3可以促进黑素瘤A375细胞的转移,ETRB阻断剂BQ788可阻断该效应;2) ET-3可以促进黑素瘤A375细胞从上皮型向成纤维细胞样形态转变;ET3促进黑素瘤A375细胞上皮基质转化标志分子E-cadherin表达下调, Vimentin表达上调,而ETRB阻断剂BQ788可阻断这种效应;3) ET-3可以促进上皮基质转化相关转录因子Twist及Slug在蛋白和mRNA水平上表达上调。[结论] ET-3/ETRB通路通过调节上皮基质转化相关分子E-cadherin、Vimentin及转录因子(Twist、Slug)促进黑素瘤A375细胞上皮基质转化。
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