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氨苯砜(dapsone,DDS)为砜类抑菌剂,大剂量使用时会显示出较强的杀菌作用,常被用来预防和治疗动物疾病。但是氨苯砜的毒性较大,会引起血液系统反应,会对某些器官造成一定的损害,最严重的甚至可以导致人体死亡,因此我国农业部规定禁止在所有食品动物中使用,且不得在动物性食品中检出;欧盟2377/90、37/2010也明确规定氨苯砜是禁用药物。本文设计合成DDS人工抗原,制备出了针对DDS的多克隆抗体,初步建立了检测DDS的dc ELISA法和GICA法,两者对DDS的残留进行快速检测都表现出较好的灵敏度和特异性。利用重氮化法将DDS与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联制备出免疫原DDS-BSA,利用戊二醛法将DDS与卵清蛋白(OVA)进行偶联制备出包被原DDS-OVA,采用过碘酸钠法将DDS与HRP相连制备了酶标抗原DDS-HRP。用免疫原DDS-BSA对健康的新西兰大耳白兔进行多点免疫。免疫三个月后,新西兰大耳白兔产生的抗血清效价为1:12800,将抗血清用Protein A-Sepharose 4B凝胶柱亲和层析法进行纯化,得到针对DDS的单一特异性抗体。通过对包被抗体浓度及酶标抗原稀释浓度、封闭液、离子浓度、p H值及乙腈含量等条件进行优化,在最优条件下,建立了DDS的直接竞争酶联免疫吸附法,该方法IC50为2.96μg/L,IC15为0.02μg/L,与二苯砜、4,4—二羟基二苯砜、磺胺和磺胺嘧啶等结构类似物的交叉反应率分别为1.38%、0.75%、17.22%和11.17%,表明此方法具有较高的特异性,板内变异系数范围为3.47%~12.12%,板间变异系数范围为5.22%~12.16%,证明该法的稳定性较好。在实际样品检测中,牛奶需10倍稀释、蜂蜜需5倍稀释、猪肉和鸡蛋需吹干后复溶,可有效消除基质影响,样品的加标回收率在75.45%~90.48%之间,通过常规的HPLC法对ELISA结果进行验证,结果显示R2为0.9937。证明,所建立的直接竞争ELISA方法可以用来对动物源性食品中残留的DDS进行快速定量检测。以硝酸纤维素膜为固相载体,包被DDS-OVA为检测带(T带),羊抗兔抗体为质控带(C带),在最优条件下,开发了快速检测胶体金试纸条,最低检出限为20μg/L。牛奶提取液用PBS缓冲液直接稀释5倍、猪肉和蜂蜜稀释10倍,鸡蛋稀释20倍可基本消除基质溶液的影响。该试纸条操作简便、快速,广泛应用于大批量临场动物性食品中DDS的残留快速定性检测。