论文部分内容阅读
目的：探讨局部应用不同浓度的他克莫司(Tacrolimus, FK506)预防大鼠椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的实验效果。方法：选用健康成年雄性SD大鼠72只,将其随机分成4组：0.1mg/mlFK506组、0.05mg/ml FK506组、0.01mg/ml FK506组和生理盐水对照组,每组18只。每只大鼠分别行L1椎板切除术,暴露硬脊膜,制备椎板切除术动物模型。充分止血后,将浸有不同浓度FK506和生理盐水的棉片覆盖于裸露的硬脊膜,5min后去除棉片并以生理盐水冲洗术野,逐层缝合手术切口。所有实验动物分别于术前、术后行后肢运动功能评分(BBB功能评分),并予术后四周分别行大体观察和羟脯氨酸含量测定,切除手术节段行HE染色后观察硬膜外瘢痕粘连程度,对瘢痕组织中的成纤维细胞进行计数,并检测硬膜外瘢痕组织中相关因子IL-4和TGF-β mRNA的表达情况。结果：所有实验动物术后恢复良好,未发生死亡、皮肤感染等现象。实验结果显示(1)局部用药前后实验动物的BBB评分均为21分,提示局部用药未造成实验大鼠明显的脊髓损伤。(2)术后4周沿原手术区域行局部解剖,肉眼观察发现0.1mg/ml FK506组硬膜外覆盖有薄膜样的瘢痕组织,可以完整剥离,未见或见少量出血；0.05mg/ml FK506组可见硬膜外有中等程度的粘连,不能完全剥离瘢痕组织；0.01mg/ml FK506和对照组可见硬膜外覆盖有致密的瘢痕组织,与硬脊膜紧密连接,在分离的过程中有大量出血,并有硬膜囊撕裂现象。(3)0.1mg/ml FK506组和0.05mg/ml FK506组瘢痕组织中羟脯氨酸含量明显低于对照组(P<0.05),而0.01mg/ml FK506组瘢痕组织中羟脯氨酸含量与对照组相比无统计学差异(P>0.05)；(4)组织学观察发现0.1mg/ml FK506组硬膜外有薄膜样的瘢痕组织,0.05mg/ml FK506组硬膜外可见疏松样瘢痕组织,而0.01mg/ml FK506和对照组硬膜外可见有致密的瘢痕组织,与硬脊膜紧密连接。(5)0.1mg/ml FK506组和0.05mg/ml FK506组的成纤维细胞计数明显低于0.01mg/ml FK506组和对照组(P<0.05),但是0.01mg/ml FK506组成纤维细胞计数与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)；(6)不同浓度的FK506组瘢痕组织中的IL-4mRNA的表达量明显低于对照组的表达量,差异有统计学意义(P<0.05),而0.1mg/ml FK506组瘢痕组织中的IL-4mRNA的表达量明显低于0.05mg/mlFK506组的表达量,差异有统计学意义(P<0.05)；不同浓度FK506组瘢痕组织中的TGF-p mRNA的表达量明显低于对照组的表达量,差异有统计学意义(P<0.05),0.1mg/ml FK506组瘢痕组织中的TGF-p mRNA的表达量明显低于0.05mg/ml FK506组的表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：本实验结果发现局部应用O.lmg/ml FK506能减少TGF-p和IL-4mRNA的表达,从而抑制成纤维细胞增殖、有效预防椎扳切除术后硬膜外瘢痕粘连。本实验未发现局部用药引起的动物死亡和切口感染等现象。