抗草甘膦转基因大豆的获得及后代分析

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大豆(Glycine max(L.)Merr.)是我国重要的油料作物。随着现代生物技术的发展,转基因技术已成为大豆遗传改良的重要手段之一。本研究通过农杆菌介导的子叶节法,将抗草甘膦基因G10-EPSPS转入大豆,培育具有我国自主知识产权的抗除草剂大豆新品种;同时以本实验室前期培育的抗草甘膦转基因大豆SHZD32-01为材料,对其进行抗性和栽培地生存竞争能力研究。本研究预期为我国抗除草剂转基因大豆的产业化提供材料和基础数据。主要结果如下:1.利用农杆菌介导法,以东农50和皖豆28为受体进行转化,获得了东农50的再生植株2棵,皖豆28的再生植株1棵(W28)。3株再生苗T0代PCR及叶片喷施草甘膦鉴定结果均为阳性。东农50的两株转化体在人工气候室种植时,叶片浓绿色蜡质化,结实异常。W28在T0代即生长十分健壮,草甘膦抗性较好。2.W28 T0代为杂合体,T1代草甘膦抗性分离,抗性株的RT-PCR和RT-qPCR检测结果表明,G10-EPSPS基因在根、茎、叶中均有较高的表达量,且叶片中的表达量最高,茎、花和幼荚中表达量相当,略低于叶片的表达量,根中的表达量最低;Western blot检测表明抗性株的根、茎、叶、花、幼荚和果实中均有EPSPS蛋白的表达。3.SHZD32-01在喷施1230-4920 g a.i./hm2草甘膦时生长不受抑制。在栽培地条件下,对比受体和常规栽培品种,SHZD32-01的株高、复叶数、相对覆盖度、繁育系数及落粒率无显著差异,即SHZD32-01无生存竞争优势,不具有杂草化的潜力。
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