目的：①体外建立人牙龈成纤维细胞模型,为研究细胞因子对人牙龈成纤维细胞功能的调控作用提供实验条件。②观察IL-1β和LPS干预人牙龈成纤维细胞后TRAF6的表达状况,为丰富细胞因子对牙龈组织的调控作用提供理论依据。方法：①采用原代组织块方法对人牙龈成纤维细胞进行分离、培养,用免疫组织化学的方法对细胞进行抗波形丝蛋白和抗角蛋白抗体鉴定,确定其来源；观察人牙龈成纤维细胞的生物学特性,绘制细胞生长曲线观察细胞的增值规律,建立稳定的人牙龈成纤维细胞体外模型。②选取成功培养的3～8代细胞,制作细胞爬片,以Ong/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β及0μg/ ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的LPS分别对人牙龈成纤维细胞进行干预,24小时后观察干预后人牙龈成纤维细胞形态学的变化,并采用免疫组织化学的方法检测TRAF6在各组细胞中的表达,利用医学图像分析系统对结果进行图像分析和数据收集,采用单因素方差分析法,对经IL-1β及LPS刺激人牙龈成纤维细胞后TRAF6在细胞中的表达特征进行统计分析。结果：①采用原代组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,成功的建立了人牙龈成纤维细胞体外模型,倒置显微镜下观察细胞呈现星形或长梭形,免疫组织化学染色显示细胞抗波形丝蛋白抗体阳性,抗角蛋白抗体阴性,表现出典型的源自中胚层的成纤维样细胞特性；传代培养后,3～8代细胞活力良好,增殖速度快,形态规则,而8代后细胞出现衰老凋亡迹象,增值速度明显减慢。②经IL-1β及LPS干预人牙龈成纤维细胞后用免疫组织化学的方法在蛋白水平上检测TRAF6在细胞中的表达结果显示：对照组人牙龈成纤维细胞中TRAF6呈阴性表达, IL-1β和LPS刺激人牙龈成纤维细胞后TRAF6在胞浆中呈现阳性表达。IL-1β干预人牙龈成纤维细胞后TRAF6在细胞中的表达状况显示,在实验观察浓度范围内随着IL-1β干预浓度的升高,TRAF6的表达呈现递增的趋势；LPS干预人牙龈成纤维细胞后TRAF6在细胞中的表达状况显示,在0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml实验浓度范围内对人牙龈成纤维细胞干预后TRAF6的表达出现递增的趋势,而在10μg/ml～100μg/ml实验浓度范围内对人牙龈成纤维细胞干预后TRAF6的表达则出现降低的趋势。同时经IL-1β及LPS干预人牙龈成纤维细胞后对细胞形态学的观察结果显示,随着LPS对人牙龈成纤维细胞干预浓度的升高,细胞形态逐渐发生改变,星形细胞比例增高,细胞逐渐出现衰老凋亡现象；而IL-1β对细胞干预后,低浓度时细胞形态未见明显变化,随着干预浓度的升高,星形细胞所占比例增高,细胞核变大,在实验浓度范围内未见细胞有衰老凋亡现象。结论：①采用组织块法培养人牙龈成纤维细胞法可以成功地建立人牙龈成纤维细胞体外模型,该法简便易行、成功率高,而且能很好地反映原组织的生物学特性；3～8代细胞性能稳定适于进行实验研究,8代后细胞活力下降,呈现衰老迹象不适于进行实验研究。②TRAF6在经IL-1β和LPS干预后人牙龈成纤维细胞中的表达结果提示,TRAF6参与了牙龈炎症的发生发展,在牙龈组织炎症进程中起着重要的调控作用。