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为寻找天然药物活性前体,本研究从高通量药物筛选(HTS)的技术基础——分子水平和细胞水平的筛选模型出发,对分布于山东沿海的39种海藻的甲醇提取物进行了广泛的抗炎、抗肿瘤及抗菌活性筛选。 在分子水平,本研究首先选取人白细胞弹性蛋白酶(HLE、EC3.4.21.37)为酶靶,MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-p-nitroanilide为底物,根据酶反应原理,通过酶标仪高效率测定特定吸收值,建立起较系统的HLE抗炎酶靶体外筛选技术。然后,利用该技术对海藻的甲醇提取物进行了活性筛选。结果表明:18种海藻(7褐藻,11红藻)对HLE有抑制活性,其中7种表现出较强的抑制活性,分别是鸭毛藻(Symphyocladia latiuscula)、海头红(Plocamium telfairiae)、江蓠(Gracilaria verrucosa)、细枝软骨藻(Chondria tenuissima)、粗枝软骨藻(Chondria crasscaulis)、小粘膜藻(Leathesia nana)和绳藻(Chorda filum)。7种海藻中,细枝软骨藻(Chondria tenuissima)和粗枝软骨藻(Chondria crasscaulis)有很强的抑制活性,在样品浓度为25μg/ml时抑制率分别为93.3%、95.7%,而尤以绳藻(Chorda filum)的抑制活性最强(浓度为25μg/ml时可达98.9%)。绿藻缺乏抗HLE活性。 在细胞水平,分别对这些海藻提取物进行了抗肿瘤(人肺腺癌A-549和白血病细胞HL-60细胞株)、抗菌活性(金黄色葡萄菌、大肠杆菌和白色假丝酵母菌)筛选。结果发现:在抗菌活性实验中,海藻提取物的最低抑菌浓度均大于20μg/ml;而抗肿瘤活性实验中,海藻提取物(250μ/ml)表现出较好的抑瘤活性,其中19种对HL-60有抑制作用,34种对A-549有抑制作用。对HL-60和A-549两种细胞株都有抑制作用的海藻提取物有19种,绿藻3种:孔石莼(Ulva pertusa)、石莼(Ulva lactuca)、盘苔(Blidingia minima);褐藻7种:裂叶马尾藻(Sargassum siliquastrum)、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、网地藻(Dictyota dichotoma)、海黍子(Sargassum kjellmanianun)、萱藻(Scytosiphon lomentarius)、小粘膜藻(Leathesia nana)、绳藻(Chorda filum);红藻9种:江蓠(Gracilaria 中文拘要 、、,of-l、11。·OO<I)、且 川11菜(计I·11牙I加帅V刀OOI工。I。Ill)、条拙-紫采(P()17砌。ly,。Oe汁川)、 仙儿凭(C厂辽,h工入11。了(r】,了(i)、’-X hll 11((’(、ill了lillll;k{)I7<h)i)、扇 ifW f)t藻 (。M)洲友川p0 人abe7帅l。n。b。。)、蜈蚣 腆(伙。W7o叩ja/i仇j。。a)、’;‘¥。e澡 (。\1,Iwtl()。·l(I。厂。11·Ill。1,。·Ill。I)、M((IMll,。e,。i(Ifl()lv,i.I)。t[,这 Ig flllgiJFjirll,if 比 X(止Ich;hill;门Ill。止11.Yn)、“八收(…l(3.VU>l。()I。l。)I,11)。I工11·i。I。T)fll,1趴no澡(f/tlll77.vi(I: 11:11刃;I)<1一l灯JIllllllDllZ 亏jXll 玉]洲一I间I州JZljl且二5二jU)、JS::吸I刁二 I厂11 一回划IllXZ(口〔召。I回乙Illli;砂I尸刃人I【A玉i) f刚淡(m。。厂丫人”。。川)的 *粹均人‘W’兀。 本’欠验肘b较了不同到了采削v纠痪1V呐敝一W1WI。海藻的抗NI。E汛 。H。。乡’洲分U海藻捉取物0W炎测卜引咐栅,pM海侧勺’1三M]一。J,村 5;}1’1他5M卜恫f!Z采集时I’·。I。 人佝酬m。成分分惭I。,叫J以M啊杠门!.离川脓,f灿观M)朗k化 l川(,f汁厂5MZ(*丁;·*!)1比物门t似I二了 儿E酶J帆侧仇9邢。km价o I’I一o下迈SW ill 叭C i叩二圳IS二,WIu7:J只1。,·0I【’1<J且(”5。kI.(则1吵。。I,I.0一;ul sle且‘〔忑! M门’*M凯干卜r,这 一’;W卜1扎门’Z卜)仁。卜。收广川。尸*本川。卜1他门H{卜 八物。