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【目的】 本论文旨在探讨自噬抑制剂联合化疗药物能否能增强其化疗效果，从而改善细胞耐药问题。 【方法】 通过CCK8实验确定72h表柔比星（epirubicin, EPI）作用于人肺癌细胞系A549的IC25、IC50、IC75浓度，以确定后续实验药物浓度。氯喹（chloroquine, CQ）浓度为 10μM。实验分组为不加药的对照组、单用 CQ 组、单用 EPI 组及CQ联合EPI组。通过CCK8实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验测定各实验组细胞增殖、迁移及侵袭能力的差异。采用实时定量 PCR 检测各组细胞中自噬相关基因lc3b及beclin-1的表达。Western blot方法检测细胞内自噬相关蛋白LC3B的表达差异。用流式细胞术检测各组细胞凋亡的变化及Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Cleaved casepased-9及Cleaved casepased-3的变化。 【结果】 1. EPI作用于A549细胞72h的IC25、IC50及IC75浓度分别为0.01μg/ml、0.03μg/ml及0.08μg/ml。 2. 72h CCK8实验：与对照组比较，EPI组及CQ+EPI组细胞增殖能力降低（P<0.05），且CQ+EPI组增殖能力低于单用EPI组（P<0.05）。 3. 克隆形成实验：克隆形成率 EPI 组及 EPI+CQ 组细胞低于对照组（P <0.05），EPI+CQ组细胞低于EPI组（P<0.05），而对照组细胞的克隆形成率与CQ组无差异（P>0.05）。 4. 划痕实验：经过108h后对照组及CQ组的划痕已经基本长满，EPI组仍存在较大划痕，而EPI联合CQ组残留的划痕宽度更大。 5. Transwell实验：各组细胞经过72h后，穿过Matrigel的细胞数对照组与CQ组无统计学差异（P>0.05），EPI组及CQ+EPI组低于对照组（P<0.05），CQ+EPI 组低于EPI组（P<0.05）。 6. 实时定量PCR：加药72h后，与对照组比较，EPI组及CQ+EPI组细胞自噬相关基因lc3b及beclin-1的表达分别增加51.5%及61.2%（P<0.05），而CQ组细胞无变化（P>0.05）。 7. Western blot检测不同浓度EPI（0.01、0.03、0.08μg/ml）作用于A549细胞时，自噬相关蛋白LC3B的表达，结果显示LC3B表达增强（P < 0.05），且呈浓度依赖性。 8. Western blot检测对照组、单用CQ组、单用EPI组及CQ+EPI组细胞72h自噬相关蛋白LC3B的表达。结果显示，加入CQ后LC3B表达增强（P<0.05）。 9. 流式细胞术结果显示，与EPI组细胞相比EPI+CQ组细胞凋亡率增加，差别具有统计学意义（P<0.05）。 10. Western blot检测凋亡相关蛋白Cleaved casepase-3及Cleaved casepase-9的表达。结果显示，与单用EPI组细胞比较，联合用药组细胞的Cleaved casepase-3及Cleaved casepase-9蛋白的表达增加（P<0.05）。 【结论】 1. EPI作用于A549时有自噬的增强，且自噬强度呈浓度依赖性。 2. CQ作用于A549时，可抑制自噬的发生。 3. CQ+EPI联合用药组细胞与对照组及单用EPI组细胞相比，其增殖、迁移和侵袭能力均下降，提示联合用药能更有效地控制肿瘤。 4. CQ和EPI联合用药的机制可能是通过抑制肺癌细胞系A549自噬，增强其细胞凋亡。