自体BMSC与rhVEGF165促进肩袖损伤腱骨愈合的研究

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目的:研究自体骨髓间充质干细胞(BMSC)和VEGF165对兔肩袖急性损伤修复术后腱骨愈合的促进作用。方法:采用骨髓穿刺法获取兔骨髓血,用密度梯度离心法成功分离并体外培养骨髓间充质干细胞。将60只成年新西兰大白兔,随机分为对照组、VEGF组、BMSC组。显露兔双侧冈上肌腱,于肌腱止点切断8mm。在肱骨大结节制作2个骨道,将肌腱断端缝合于大结节上。对照组每侧注射0.1ml FG, VEGF组每侧注射0.1ml FG+100ngVEGF, MSC组每侧注射0.1ml FG+1×106BMSC。分别在术后4、8、12周时间点各组处死3-5只取材,进行组织学研究,分析评估腱—骨界面的愈合情况。结果:MSC组和VEGF组腱骨愈合率分别为89.5%和90.6%,均明显高于对照组(69.4%),经卡方检验P<0.05。对照组术后8W在腱骨界面之间出现成熟的斑痕组织,腱—骨结合紧密,以胶原纤维连接为主,术后12W时腱骨界面出现纤维软骨细胞过渡带。MSC组术后4W时腱骨间以肉芽组织连接为主,局部出现类软骨细胞;术后8W时出现较为成熟的软骨细胞移行带;术后12W时腱骨连接非常紧密,胶原纤维锚定于骨质内,纤维之间排列有纤维软骨细胞,腱骨间形成“潮线”,形态学上类似于正常肩袖的直接止点样结构。腱骨愈合成熟度评分术后各观察时间点MSC组均明显高于对照组(P<0.05)。VEGF组术后4W时腱骨间以胶原纤维连接为主,可见较多新生血管;术后8W时腱骨间形成较多类软骨细胞,血管较4W时减少;术后12W时腱骨结合紧密,结合部可见较多胶原纤维,部分纤维锚定于骨质内,胶原纤维间亦可见纤维软骨细胞,但未见“潮线”结构。腱骨愈合成熟度评分术后4W、8W时明显高于对照组(P<0.05),术后12W时与对照组无明显差别(P>0.05)。结论:肩袖修复术后腱骨界面植入白体BMSC或VEGF可以提高肩袖愈合率,促进腱骨间纤维软骨带的形成,VEGF在早期可以促进新生血管形成,有利于改善腱骨的血运,促进腱骨愈合。
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