本实验以堆积床生物反应器(多孔微载体)对中国仓鼠卵巢细胞表达EPO细胞大规模扩增培养为目标,并围绕针对中国仓鼠卵巢细胞表达EPO无血清上清扩增后的纯化工艺、稳定性、保存、质量控制等方面进行了一系列研究。本实验主要是对重组人促红细胞生成素进行大规模扩增条件的摸索来选取最佳的条件来进行大规模的培养,通过生物反应器扩增方式从培养基配制、种子准备、培养过程控制和检测等多方面的研究,确定堆积床生物反应器培养,具有工作量小,工艺简单、细胞表达活性高、培养过程污染机会减少等优点,来进行最佳的培养。一般的过程为：先经过灌流液,到达蓝胶层析,再经过超滤浓缩得到的产物在经过离子交换I层析,然后再进行C4反相层析,这样得到进一步的优化,得到的产物再进行离子交换Ⅱ层析,最后进行分子筛层析来达到提高目的产物纯度的要求。这样的得到的纯产物,在进行蛋白含量的检测,以及细胞内毒素和外源DNA含量、CH0蛋白等指标的检测来确定是不是得到纯的产物。纯化后的EP0原液的纯度、活性、分离效果及回收率等产品质量指标,达到了欧洲药典的指标要求(EP7.0)。通过我们的研究表明可以用生物反应器来进行重组人促红细胞生成素的大规模培养生产。将柠檬酸钠、柠檬酸以及pH=7.0的缓冲液加入到已经纯化的样品溶液中,稀释EPO浓度为20μ g/ml,加入0.25%(w/v)人血清白蛋白,用0.22μ m微孔滤膜过滤除菌后才成为成品制剂,进行无菌实验,并取样测其活性,用上述缓冲稀释液调整活性单位浓度为2000IU/ml,加入与人体组织相溶的稳定剂,并研究其最佳保存方式为：2-8℃冷藏条件可保存1年以上(活性、物理性状、pH值均无明显改变)；室温下保存不宜超过四周；保存本品时应避免高温且不宜冷冻保存。这就有利于EPO大规模培养后进行有效的保存及更广泛的临床应用。