富士苹果芽变的细胞学与分子生物学鉴定研究

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本文以16个富士系苹果的芽变初选优系及其对照品种富士、长富2、长富6为试材,进行了花粉粒形态性状、气孔大小密度等细胞学方面的研究,并应用RAPD和ISSR技术进行了分子生物学鉴定,结果如下:1.无论是花粉粒的大小、形态还是气孔的大小、密度,芽变初选优系与其对照之间均无显著差异,所有试材的花粉粒的形状均为圆三角形。2.建立了苹果RAPD扩增反应体系:25μl反应液中,10×Buffer2.5μlMgCl22.0mM,dNTP0.19mM,primer 0.24μM,DNA30ng,Taq DNA polymerase1U。3.筛选了300个随机引物,其中S1147和S1189鉴别出丰6芽变初选优系;S1125、S1141、S1138鉴定出D1芽变初选优系;S1073、S1039、S1064、S1056鉴别出D2芽变初选优系;S1124、S1127、S1140、S1179、S1181鉴别出了D3芽变初选优系;S1146、S1302、S1090、S1291鉴定出了D4芽变初选优系。4.建立了苹果ISSR反应体系:25μl反应液中,10×Buffer2.5μL,MgCl21.5mM,dNTP0.20mM,primer0.4μM,DNA30ng,Taq DNA polymerase1U。5.构建了富士、长富2、长富6、红星、新世纪、美国8号6个品种的ISSR指纹图谱,其中IS061构建了富士、长富2、长富6三个品种的指纹图谱,IS026成功地构建了富士、红星、新世纪、美国8号的指纹图谱。6.运用ISSR技术鉴定出了9个富士芽变初选优系,其中有5个芽变初选优系应用RAPD技术无法鉴定。
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