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多糖生物活性广泛,具有多种生理药理功能。多糖经过硫酸酯化修饰后其药理活性可以得到显著提高,成为具有良好开发前景的药物。以往对多糖及其酯化产物的研究多集中于抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗凝血、增强免疫等生理药理活性,但其对心脏等肌肉组织的作用研究尚不多见。本文从马尾松花粉中提取多糖,进行硫酸酯化,观察了其中的60%乙醇分级组分对心肌的作用,并初步探讨了其可能的作用机制。实验具体分为以下五个部分:一、马尾松花粉多糖的提取及硫酸酯化:采用热水浸提法提取,40%、60%乙醇分级沉淀,得率分别为0.328%、3.071%。取500mg 60%分级多糖进行硫酸酯化,得735mg酯化多糖,得率为147%。二、60%马尾松花粉多糖及其酯化多糖理化性质测定:紫外光谱扫描显示有明显多糖类物质吸收峰,无明显核酸蛋白杂质;苯酚硫酸法测定60%多糖含量为88.69%;酯化60%多糖取代度为1.762;红外分析表明多糖具有糖类物质的特征吸收峰,酯化60%多糖具有硫酸酯键的特征吸收峰。三、60%多糖(PPM60)及其酯化多糖(SPPM60)对离体蟾蜍心肌生理特性的影响:观察了PPM60及SPPM60对离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响;用普萘洛尔、氯化镉、维拉帕米等药物对心肌上的特异受体进行阻断;并将其与其他类型多糖、不同取代度的酯化多糖以及强心苷地高辛进行作用比较,初步探讨了酯化多糖对心肌的作用机制。结果表明:PPM60有降低离体蟾蜍心肌收缩力的作用,SPPM60则有增强心肌收缩力的作用,两者对心率都没有影响;SPPM60可以逆转普萘洛尔、氯化镉对心肌的抑制作用,而在维拉帕米存在的情况下,其正性肌力作用受到抑制,说明SPPM60的正性肌力作用可能是通过胞膜上的L-型钙通道介导完成的,而与β1受体无关。此外,酯化马尾松花粉多糖的这种正性肌力作用是其一个特有现象,作用效果随着取代度的升高而不断加强。四、60%多糖及其酯化多糖对离体蟾蜍腓肠肌生理特性的影响:结果表明,PPM60有增强腓肠肌收缩力的作用,而SPPM60则没有作用。多糖与其酯化多糖对不同肌肉类型产生了不同的作用效果。五、60%多糖及其酯化多糖对心肌细胞活性氧自由基的影响:PPM60作用于心肌细胞后,增加了氧自由基的产生;而SPPM60作用于心肌细胞后,胞内氧自由基浓度略有降低,表现出了一定的清除胞内氧自由基的作用。说明,SPPM60虽然可以增加心肌细胞内的Ca2+浓度,但并没有引起胞内形成Ca2+超载,因而不会带来大量氧自由基的产生,避免了由Ca2+超载所引起的一系列细胞损伤。