研究背景:原发性肝癌是多发病、常见病,恶性程度高、预后凶险,其发病机制十分复杂,主要包括毒物、炎症等导致的肝脏组织损伤,癌基因或抑癌基因突变,肝干细胞和肝癌干细胞作用等,其中90%的肝癌发生发展基于肝脏慢性炎症。目前有研究发现TGF-β1/smad信号通路参与损伤反应的多个方面:纤维生成,细胞的生长、抑制和凋亡,在肝癌的发展和侵袭中发挥重要作用。中医药可以通过多靶点、多途径作用,减轻患者临床症状,延长生存期,提高生存质量,为肝癌的临床治疗提供新思路。大量临床研究表明,扶正化瘀方不仅对肝纤维化具有显著疗效,而且对肝癌前病变有一定的作用。本课题通过体外实验研究扶正化瘀含药血清对肝癌细胞7701和7402的影响,探讨其抗肿瘤作用效果及潜在的作用机制。研究目的:研究扶正化瘀含药血清对2种肝癌细胞株的抑制作用和扶正化瘀方对TGF-β1/Smad信号通路的干预作用,探讨扶正化瘀方的体外抗肝癌作用及其可能存在的机制,以期为中药防治肝癌提供新的思路和科学实验依据。研究方法:以肝癌细胞株QGY-7701和BEL-7402为研究对象,通过MTT实验、平板克隆形成实验、流式细胞凋亡术、Western Blot实验分别观察扶正化瘀含药血清对肝癌细胞株的增殖、集落形成能力、细胞凋亡和TGF-β1/smad信号通路相关蛋白表达的干预作用。研究结果:(1)0.5%-20%的浓度之间的扶正化瘀含药血清显著抑制人肝癌细胞QGY-7701和BEL-7402细胞的增殖,且具有浓度依赖性。(2)0.5%-20%的浓度之间的扶正化瘀含药血清显著抑制人肝癌细胞QGY-7701和BEL-7402细胞的集落形成能力。(3)FCM凋亡检测发现,扶正化瘀含药血清处理后,人肝癌细胞QGY-7701和BEL-7402凋亡呈浓度依赖性增加。(4)扶正化瘀含药血清上调促凋亡蛋白Capase8的表达,上调肝癌细胞株中TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达,下调该信号通路下游靶基因肿瘤促进因子PAI-1的表达。研究结论:扶正化瘀含药血清抑制肝癌细胞增殖和克隆形成,促进肝癌细胞凋亡,上调促凋亡蛋白Capase8蛋白的表达,干预TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达。其抗肝癌作用机制可能是通过干预TGF-β1/Smad信号通路实现的。