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【目的】探讨云南锡矿炼厂烟尘在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化的一系列改变,为进一步揭示个旧矿工肺癌的病因和发病机理提供理论和实验依据。【方法】(1)选用50μg/ml和200μg/ml的云锡炼厂烟尘毒染永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN),每次染毒72h,隔代染毒直至第9代,自第10代起常规培养至第35代。(2)倒置显微镜观察活细胞形态。(3)流式细胞仪分析细胞周期变化。(4)锚着独立性生长实验检测上皮细胞恶性转化。(5)免疫细胞化学染色及免疫印迹检测分析Ⅰ型上皮细胞转化标志物AQP-5表达变化;上皮-间质细胞转化标志物SP-B及CTGF表达变化;转化标志物MDM2及FHIT表达变化。【结果】(1)云锡炼厂烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞后,细胞形态改变;超微结构改变,板层小体消失;锚着独立性生长实验阳性且克隆形成率与培养代数相关性有统计学意义(P＜0.05),而与烟尘浓度的相关性无统计学意义(P＞0.05):S期比例明显增高。(2)免疫细胞化学检测高低浓度第25代及第30代细胞CTGF、MDM2表达阳性,SP-B及FHIT表达阴性;而未受烟尘诱导的空白对照同代细胞CTGF、MDM2表达阴性,SP-B、FHIT表达阳性。(3)免疫印迹检测高低浓度组第25、30、35代细胞示SP-C失表达,Vimentin及AQP-5无表达;空白对照组细胞SP-C有表达,Vimentin及AQP-5无表达。【结论】1.云锡炼厂烟尘可以引起体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)发生恶性转化。本研究建立了云锡炼厂烟尘诱导RLE-6TN细胞恶性转化的模型。2.云锡炼厂烟尘体外诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化的程度与染毒后培养代数有关,而与烟尘浓度无明显相关,诱导代数越长,恶性转化程度越高。3.云锡炼厂烟尘诱导RLE-6TN细胞转化过程中细胞失去了肺泡Ⅱ上皮的某些特征并表达CTGF。细胞的恶性转化与MDM2高表达、FHIT失表达相关。