苍耳素Ⅲ-1杀菌活性成分的分离鉴定及可湿性粉剂的加工研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:forgauss
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苍耳素Ⅲ-1是从植物苍耳中提取分离出的抑菌活性物质,对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium Schl.)、黄瓜黑星病菌( Cladosporium cucumerinum Ell. et Arthur)和番茄早疫病菌(Alternaric solani(Ellis et Martin)Jones et Grout)等蔬菜常见病害有较强的抑制作用。本文对苍耳素Ⅲ-1中的抑菌成分进一步分离纯化及鉴定,获得苍耳素Ⅲ-1活性物质的化学结构式。通过对制剂助剂的筛选研究,确定制剂配方中最佳填料、分散剂、润湿剂及其制剂最佳配比,加工得到25%苍耳素Ⅲ-1可湿性粉剂,并进行了质量检测和室内药效评价。研究结果如下:1.以黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium Schl.)为供试菌,采用柱层析和薄层层析的方法对苍耳素Ⅲ-1中抑菌成分的进行分离和纯化,对分离的各流分进行抑菌活性的测定,选取抑菌活性较高的流分再进行薄层层析法分离及生物测定,据苍耳素Ⅲ-1抑菌活性较高流分的TLC分离的结果,选取苍耳素Ⅲ-1高活性流分5号,10号进行抑菌成分的GC-MS分析,主要抑菌成分有呋喃甲醛(2-Furancarboxaldehyde);5-羟甲基糠醛(5-Hydroxymethyl-2-furaldehyde),4-羟基-4-甲基-2-戊酮(Diacetone alcohol)等。2.以黄瓜黑星病菌( Cladosporium cucumerinum Ell. et Arthur)和黄瓜黑星病菌(Alternaric solani(Ellis et Martin)Jones et Grout)为供试菌,测定了活性成分呋喃甲醛、4-羟基-4-甲基-2-戊酮、苍耳素Ⅲ-1对供试菌的抑菌活性,结果表明:苍耳素Ⅲ-1对黄瓜黑星病菌和番茄早疫病菌的菌丝生长抑制的毒力最高,其EC50分别为0.00052mg/mL和0.0104mg/mL;呋喃甲醛、4-羟基-4-甲基-2-戊酮的抑制率都达到了90%以上,具有良好的抑菌效果;苍耳素Ⅲ-1的抑菌率为98.1%,说明苍耳素Ⅲ-1的抑菌作用主要是其含有的抑菌物质作用的结果,而不是溶剂在起主要抑菌作用。3.对苍耳素Ⅲ-1进行剂型研究,筛选并确定剂型配方中的助剂及其最佳配比。25%苍耳素Ⅲ-1可湿性粉剂配方为苍耳素Ⅲ-125%;白炭黑63%;分散剂甲基萘磺酸钠甲醛缩合物(MF)10%;润湿剂十二烷基苯磺酸钠(ABS)2.0%。4. 25%苍耳素Ⅲ-1可湿性粉剂进行了质量评价,pH值为8.59;润湿时间为45s;悬浮率(%)为83.8;细度(通过325目筛)(m/m)为99.2;起泡性8 mL,各项指标均达到国家标准,热/冷储后无结块、不发粘,能自由流动,润湿性和悬浮率良好。5. 25%苍耳素Ⅲ-1可湿性粉剂在5mg/ mL对番茄早疫病菌菌菌丝生长的最高抑制作用为65.22%,对黄瓜黑星病菌菌丝生长的最高抑制作用为70.20%; 25%苍耳素Ⅲ-1WP100倍对番茄灰霉病的保护作用和治疗作用分别为54.08%和55.09%, 25%苍耳素Ⅲ-1WP200倍、400倍、800倍对番茄灰霉病的保护作用和治疗作用依次降低,均高于对照丙酮的防效。
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