两种抗癌中药与顺铂联用对人乳腺癌MCF-7细胞系增殖抑制作用及机制的研究

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目的:本研究通过研究不同浓度的传统中药姜黄素、去甲斑蝥酸钠和化疗药物顺铂在不同时间,单药以及联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制的作用以及诱导凋亡和细胞周期的影响,初步探讨去甲斑蝥酸钠与顺铂联用抑制人乳腺癌MCF-7细胞株可能的作用机制,同时对比单独用药与联合用药细胞增殖抑制作用的情况,从而为乳腺癌治疗策略提供有效的基础实验数据做参考。方法:1、人乳腺癌细胞MCF-7细胞体外培养至对数生长期。2、通过MTT法检测不同浓度的姜黄素、去甲斑蝥酸钠和顺铂以及两药联合作用于MCF-7细胞24、48和72小时后细胞增殖的情况。3、使用流式细胞仪检测去甲斑蝥酸钠(30μg/ml、15μg/ml)、顺铂(1.25μg/ml、0.625μg/ml)单独以及联合作用于MCF-7细胞48小时后诱导凋亡的情况和细胞周期的影响。结果:1.姜黄素、去甲斑蝥酸钠和顺铂对MCF-7细胞增殖的抑制情况去甲斑蝥酸钠和顺铂对MCF-7细胞均有增殖抑制作用,并且抑制效果呈时间-浓度依赖性的表现,姜黄素通过实验的统计结果来看对MCF-7无明显抑制作用。2.不同浓度去甲斑蝥酸钠与顺铂联用对人乳腺腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用联合应用去甲斑蝥酸钠(30μg/ml、15μg/ml)和顺铂(1.25μg/ml、0.625μg/ml),对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用均高于单独用药组,随着去甲斑蝥酸钠和顺铂的浓度增加,抑制作用增强,同时,单纯的增加去甲斑蝥酸钠的浓度,对MCF-7的抑制作用也在增强,随着作用时间的延长抑制作用增强。3.去甲斑蝥酸钠、顺铂以及联合用药诱导细胞凋亡作用及细胞周期的影响将MCF-7用去甲斑蝥酸钠(30μg/ml、15μg/ml)处理48h后,G0/G1期细胞比例明显缩小,处于S期细胞比例增多,流式细胞检测结果表示人乳腺癌MCF-7细胞被去甲斑蝥酸钠阻滞在S期(p<0.05),影响细胞无法向G2/M期转化,阻滞乳腺癌MCF-7细胞的脱氧核糖核酸合成,抑制肿瘤细胞的增殖进行。顺铂(1.25μg/ml、0.625μg/ml)作用于MCF-7细胞48h之后与对照组相比较,由细胞分布情况可见,G0/G1期细胞比例显著缩小,S期细胞比例明显增加,结果证明顺铂能够将人乳腺癌细胞增殖抑制在S期(p<0.05),从而使细胞不能向G2/M期转化,进而实现对肿瘤细胞的增殖抑制作用。去甲斑蝥酸钠、顺铂联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞的细胞凋亡率较单独用药组显著增加(p<0.01)结论:1.去甲斑蝥酸钠、顺铂都可以抑制MCF-7细胞的增殖,在一定范围内,呈时间-浓度依赖性。2.同纯药组相比较,去甲斑蝥酸钠、顺铂两药联合后,对MCF-7细胞增殖抑制作用明显加强。3.去甲斑蝥酸钠、顺铂都可以使MCF-7细胞周期阻滞在S期,而联合用药组的细胞凋亡率显著高于单药组。
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