肝靶向马蹄金素衍生物的合成及抗乙肝病毒活性研究

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马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]是本课题组从民族药马蹄金(Dichondra repens Forst.)中分离得到的具有抗乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)活性的苯丙氨酸二肽类化合物,通过以其为先导化合物设计并合成了一系列具有抗HBV活性的马蹄金素衍生物。将其中一个优选的衍生物Y101作为候选药物“替芬泰”完成了其临床前研究,获得国家食品药品监督管理总局颁发的化药1.1类新药的临床批件(原料药及其制剂批件号:2013L02491,2014L00070),目前正在进行“替芬泰”的I期临床试验。衍生物Y101的初步药代实验结果表明,其在组织中分布广泛,在肝脏组织中的浓度不太高。肝靶向给药系统(Hepatic targeting drug delivery system,HTDDS)可将药物有效输送至肝脏病变部位,减少其全身分布。有研究表明半乳糖基化修饰的药物能被肝实质细胞膜上的去唾液酸糖蛋白受体(Asialoglycoprotein receptor,ASGP-R)特异性地识别和结合,使药物在肝脏部位富集。因此,为了提高该类化合物在肝脏病变部位的药物浓度,增强其抗HBV活性,减少不良反应,本课题将对马蹄金素衍生物进行半乳糖糖基化修饰,设计并合成一系列肝靶向马蹄金素衍生物。本课题设计了3种类型的肝靶向马蹄金素衍生物,(1)D-半乳糖与马蹄金素衍生物的醇羟基进行直接连接的衍生物;(2)D-半乳糖通过二缩三乙二醇为连接臂与马蹄金素衍生物的酚羟基进行间接连接的衍生物;(3)通过Cu(I)催化的叠氮化物-炔烃环加成反应(“Click”反应),用叠氮基修饰的D-半乳糖与炔丙基修饰的马蹄金素衍生物进行间接连接的衍生物。本课题共合成了以上3种类型的19个肝靶向马蹄金素衍生物,通过1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、HMQC和ESI-MS等波谱对所合成的目标化合物进行了结构表征。本课题对合成的肝靶向马蹄金素衍生物进行了抗HBV活性筛选。以人肝癌细胞2.2.15细胞为乙型肝炎病毒载体,测定了14个目标化合物抑制HBV DNA复制的能力。活性筛选结果表明,有12个化合物对2.2.15细胞的HBV DNA的复制有抑制作用,其中化合物87、89、91的效果较为明显,IC50分别为16.76μg·m L-1、28.67μg·m L-1、18.65μg·mL-1。该结果可为肝靶向马蹄金素衍生物的进一步研究提供一定依据。
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