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目的：探讨Connexin30(Cx30)和Connexin26(Cx26)组成的同型缝隙连接通道对短单链核酸的通透性，为研究Cx26及Cx30突变致聋的机制提供新的思路。 方法：（1）体外Cx26和Cx30缝隙连接的建立：提取pAAV-CMV-Cx26-GFP和pAAV-CMV-Cx30-GFP质粒，测序后转染HEK-293细胞建立体外Cx26和Cx30缝隙连接通道。为验证体外建立通道有无功能，分别向未转染的HEK-293细胞对以及表达Cx30和Cx26缝隙连接的细胞对的一侧细胞显微注射FITC标记鬼笔环肽，在注射后1min、5min、15min、20min、30min比较观察对侧细胞有无荧光。（2）同型Cx26和Cx30对单链脱氧核苷酸的通透性：用Cy3作为示踪剂标记12bp（序列为线虫源性）单链DNA的5＇端，HPLC纯化。将其分别显微注射到转染Cx30和Cx26缝隙连接的细胞对的一侧细胞，在注射后1min、5min、15min、20min、30min比较观察对侧细胞有无荧光。 结果：（1）质粒测序结果为小鼠源性的Cx30和Cx26的cDNA。显微注射FITC标记鬼笔环肽30min后，未转染缝隙连接细胞对的非注射细胞未见红色荧光。显微注射FITC标记鬼笔环肽1min后，转染表达Cx30和Cx26缝隙连接细胞对的非注射细胞可见红色荧光。（2）显微注射5＇Cy3标记12bp单链脱氧核苷酸30min后,在观察时间内转染表达Cx30和Cx26缝隙连接细胞对的非注射细胞未见红色荧光。 结论：体外建立的Cx26和Cx30缝隙连接通道具有大分子染料通透功能。通过显微注射技术建立了研究短单链核酸缝隙连接通透性的方法。Cx26和Cx30缝隙连接通道可能对5＇Cy3标记的12bp单链脱氧核苷酸不具有通透性。