加拿大红豆杉中紫杉醇提取分离工艺及含量测定研究

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紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)是一种对肿瘤有抑制作用的三环二萜类化合物,其抗癌机理独特,对各类癌症都有特殊的疗效。近年来,紫杉醇成为了天然植物药物领域中最热点的新药之一。但由于紫杉醇在植物体中含量仅万分之几,使得紫杉醇的分离纯化非常困难,因此建立一种高效的提取分离纯化方法便显得尤为重要。本文分为五章,第一章,对红豆杉的化学成分研究现状、紫杉醇的提取分离纯化研究状况、紫杉醇抗肿瘤作用研究、工业生产面临的问题等方面进行了综述。第二章,四段逆流法提取红豆杉中紫杉烷类化合物工艺研究,对红豆杉中的紫杉醇及其类似物采用四段逆流法进行提取,对工艺的影响因素—甲醇浓度、接触时间、温度等进行了详细的考察,确定了最佳条件,建立了一种新的紫杉醇生产提取工艺。第三章,对浸膏采用RP-HPLC法进行测定紫杉醇的含量,建立了一种加拿大红豆杉浸膏中紫杉醇的含量测定方法,结果表明该方法操作简便,精密度好,准确可靠。第四章,将正相色谱和反相色谱相结合,建立了一种从红豆杉浸膏中提取纯化紫杉醇和三尖杉宁碱(cephalomaninne)及10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylBaccatinⅢ、10-DAB)、7-表紫杉醇(7-epitaxol)、紫杉宁(Taxinine)、美丽红豆杉素(Taxagifine)的方法,在反相色谱中,使用了一种新型的自制多孔高分子树脂填料(JTY-1)作为固定相,实验结果表明,JTY-1对紫杉醇和三尖杉宁碱具有高的选择性、不可逆吸附小,且该填料可再生利用。第五章,通过对紫杉醇生产中废硅胶的再生实验,并将其与新硅胶从吸附性能、层析分离性能上进行比较,找到了适于工业化生产的再生方法,该方法简便、经济效益高。本文创新点:1、建立了一种新的紫杉醇提取方法-四段逆流法,并对该方法进行了工艺考察,表明该方法适宜于加拿大红豆杉中紫杉醇的提取,为工业化生产提供了一种新的途径。2、建立了一种RP-HPLC测定加拿大红豆杉中紫杉醇的方法,所使用流动相简单,适宜于紫杉醇的检测。3、分离得到的化合物Taxinine、Taxagifine为国内首次从加拿大红豆杉中分得。4、所建立的紫杉醇工业生产中废弃硅胶再生的方法,为国内首次报道的紫杉醇生产中硅胶再生方法。
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